过表达brcc36蛋白对慢性压力负荷诱导的小鼠心肌重构的影响及机制

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1、'.娘芽中么悚娜-、'?'、'少??t/^、学§M120565/分类号X./考卢,DC密级--—-始y尸^::f.J'為豕‘―,,^、中,iI4A冷、'聲YANGZHOU彎攀UNIVERSITY、.1|;护.,中令聲带,'V斬''■?:.i^vv今Am'、:啤硕壬学侄冷丈,八,鸡巧.伊或、:抓CC3满过表达6蛋白孙廈性压力负荷诱导的小鼠心肌若專嘴"'中V論叱重构自誦減制‘—..M.^.j鱗I■..,v.:.4-)爾两,

2、‘?..^輪喘和:朱华江,去冷、卢‘,V;<i指导教师姓名:张振刚教授,扬州大学、江苏拐州,225009/'申请学位级别学科专业名称:内科学:郁壬201542015年5月论文提交日期;年月论文答辩日期:1举仿授予单位:205年6月:扬州大学学位授予日期,IJW.答辩委员会主席:严金川救授聲。’'t:.、為無...、鮮'V.-、rHr‘V/、V/rV.、、"‘、‘?巧*巧毒Kr20巧年5月绎%,養,^窘3/:每W細端攀瞬目录

3、中文摘要1英文摘要3英文缩写词6一第章前言7二第章材料与方法921.实验材料92119..实验对象2129..仪器设备和设备21310..主要试剂214主10..要试剂配制22方法12.22112..小鼠基因鉴定2.2.2蛋白定量132.2.3组织脱水程序142.2.4組织中提取蛋白14-2.25RealTiPCR14.me步裸2.2.6Westernblo

4、t步骤17第H章实验结果193.1BRCC36转基因小鼠鉴定19巧3.1.1实验村料及方法3巧1..2实验结果3‘21.2过表达BRGG36对慢性压力负荷诱导的小鼠。脏肥厚的影响3.2.1实验材料及方法213.2.2实验结果21'33BRCC36i>脏纤维化的影响C2.过表达对慢性压力负荷诱导的小鼠333‘1。脏天狼星红染色结23..老鼠果332‘。脏组织细胞外RNA24..小鼠基质m表达水平的检测34过表达抓G的6对慢性压力肌细

5、胞内Sm……巧.负荷诱导的小鼠佔ad3活化的影响3.5过表达BRCC36对抗慢性压力资荷下诱导的组织细胞损伤2736过表达抓GC36促进慢性压力负荷下诱导的DNA损伤修复.28第四章讨论31第五章结论35参考文献35综述39致谢46攻读学位期间发表的学术论文目录47扬州大学学位论文原创性声明和版权使用授权书48朱华江:过表达BRCC36蛋白对慢性压力负荷诱导的小鼠也肌重构的影响及机制1过表达BRCC36蛋白对慢性压力负荷诱导的小鼠心肌重

6、构的影响及机制中文摘要目的:探讨BRCC36蛋白在慢性压力负荷诱导的小鼠屯、肌肥大和纤维化中的作用及其可能作用机制。方叛-1)CC%MHC-BRCC36)利用商业服务构建也脏特异性过表达BR的转基因小鼠U,并进行鉴定。2)转基因动物完成后,通过在右无名动脉和左侧颈总动脉之间部分缩窄主动脉弓(TAC)■.而诱导形成慢性压力负荷模型,将制好的模型分为四狙:野生型假手术组、野生型主动脉缩窄組、转基因型假手术组、转基因型主动脉缩窄组。38、-)模型建立周后,检测也肌肥厚程度;将屯化样本做

7、苏木素伊红染色W及天狼星-红染色;采用实时定量聚合酶链反应(RealtimePCR)方法检测细胞外基质结缔组织生长因子(connectivetissuerowthfactor,CTGF)、(Periostin)表达变化骨膜蛋白;Westernblotg-3-2AX检测psmad、YH、Rad51蛋白的变化情况。结果:-1)-ltRT通过基因鉴定、westernblot、ReaimePCR检测证实在基础状态下BRCC%转基因小鼠屯、脏组织中BRC。C36蛋白表达较黙生型小鼠明显升商2)

8、在野生型小鼠,TAC手术姐相对于假手术组在也脏重量指数、左也室重量指数、也肌细胞直径均増加、,而在BRCC36也脏过表达的转基因的小鼠组,TAC诱导的屯化肥厚较野生型小鼠比较明显减轻。3)天狼星红染色结果显示:天狼星红染色可见野生型小鼠姐TAC手术组血管周围W

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