转录因子zmnam056调控玉米淀粉合成相关基因表达的初探

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1、分萊号Ｓ引３学号Ｓ２０１２２０５８四川巧化大学硕±学位论文转录因子ＺｍＮＡＭ０５６调控玉米淀粉合成相关基因表达的觀探’巧田丹指导教腑黄玉遣教巧学科专业作物遗传育种硏究方向韦乂馈佑育神－Ｉ．，ｉ？？？１＇．Ｉ■．■！＇１ｉ，１２０１５年５月ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮＳｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒＭＡＳＴＥ民ＤＥＧＲＥＥＴｈｅＡｎ

2、ａｌｓｅｏｆＴｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎＦａｃｔｏｒＺｍＮＡＭ０５６ｙｐＲｅｇｕｌａｔｅｓＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＧｅｎｅｓＲｅｌａｔｅｄｔｏＳｔａｒｃｈＳｎｔｈｅｓｉｓｉｎＭａｉｚｅｙＢｙ：ＬｏｎｇＴｉａｎｄａｎＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ－．ＨＵＡＮＧＹｕｂｉＭａ０ｒ：ＣｒｏＧｅ打ｅｔｉｃｓａｎｄＢｒｅｅｄｉｎｊｐｇＷｅｎｉａｎｉｃｈｕａｎＣｈｉｎａ６１１１３０ｊｇ，Ｓ，，Ｍａ２０１５ｙ论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所化得的成

3、来。仪化所知，除了文中特别加Ｗ柄注和致谢的地方外，学位论文中不包＇含化他个人或集体。经化巧或撰弓过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学－？或其它教诗机构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。巧身年（硏究生签名：怎月＾鬥关于论文使用授巧的声明，目本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定Ｐ；学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借、阅，可Ｗ采用影印缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在

4、不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名；若巧冉Ｊ＾〇（Ｓ年月＾曰心．导师签名．名＾厂年／月《日摘要一玉米（ＺｅａｍｗＬ．）大粮食作物是世界第，种植面积和产量均居三大粮食作一，。物之首玉米淀粉也是各种植物捷粉中化学成分最佳的淀粉之如今，随着世界人口的ｎ益增加，资源及耕地面积的Ｆ１益减少，对作物产量及晶质的要求也就越来越高。淀粉的生物合成过程的核也包括ＡＤＰＧ的合成，，多糖链的延仲多糖链的一个十分复杂的过程一的分支，多糖链的去分支。淀粉的生物合成是，是在系列酿的共同催化下完成的，在好粒胜乳中淀粉合成的最后阶段

5、涉及四类非常关键的二磯－ＡＧＰ酶类：腺巧酸葡萄糖焦稱酸化酶（ＡＤＰｇｌｕｃｏｓｅｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｓｅ，ａｓｅ）、淀粉合成酶（Ｓｔａｒｃｈｓｎｔｈａｓｅ，ＳＳ）、淀粉分支酶（Ｓｔａｒｃｈｂｒａｎ油ｉｎ州ｚｙｍｅ，Ｓ目Ｅ）ｙｇ和淀粉去分支酶（Ｓｔａｒｃｈｄｅｂｒａｎｃｈｉｎｇｅｎｚｙｍｅ，ＤＢＥ）。目前对于淀粉相关合成酶的功能研究做得相对成熟，但对于淀粉合成相关酶的上游调控机制研究，即淀粉合成相关酶的顺式作用元件和反式作用因子的研究报道较少。我们根据文献报道和现有基因资源选取在玉米胚乳中特异表达或高表达的参与淀粉合成

6、关键酶编码的８个基因：佛２、轨２、况／、批／／ｆｌ、说／／／〇、ｓ６ｅ／化、Ａａ／－。课题组前期通过ＲＮＡｓｅｑ测定玉米巧粒灌浆时期不同关键点化乳ＲＮＡ表达谱，筛选了可能参与玉米脏乳淀粉合成的转录因子；同时利用公共数据库通过共相关分析、筛选与上述８个淀粉合成相关基因表达相关的转录因子，取相关系数极高的转录因子列为候选转录因子。我们比较通过这两种方法筛选到的候选转一录因子，发现了个共同的ＮＡＣ家族的转录因子，并命名为ＺｍＮＡＭ０５６。在此－ＰＣ民ＰＣＲ基础之上采用半定量ＲＴ或巧光定量、基因瞬时表达、酵母单杂交Ｗ及亚细胞定位继续验证筛选的转录因子

7、对淀粉合成关键酶基因表达的调控作用，具体结果如下：１Ｗ玉米优良骨干自交系Ｂ７３为实验材料，我们成功从玉米胚乳中克隆到该一３９。转录因子，该基因含有个编码１个氨基酸的开放阅读框其他植物氨基酸序列进行同源比对，发现转录因子含有ＮＡＣ转录因子特有的Ｎ端ＤＮＡ结合结构域和Ｃ端转录激活结构域。２对心基因表达模式进行了分析。半定量ＰＣＲ结果表明基因在巧粒中特异表达，结果表明基因在；随后实时巧光定量ＰＣＲＩ１０授粉后前７天的巧粒中表达量较低，授粉后天开始大量表达，授粉后２０天达到最高，并且发现同玉米胚乳淀粉合成