猪脂肪合成过程分子调控网络的构建及相关基因转录水平的表达分析

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1、万方数据分类号：0．38密级：公开单位代码：10086学号：2011383猪脂肪合成过程分子调控网络的构建及相关基因转录水平的表达分析ReconstructionofMolecularRegulatoryNetworkandExpressionAnalysisatTranscriptionallevelofGenesrelatedtoFatSynthesis学位申请人：陶隽指导教师：贾青教授学科专业：遗传学学位类别：理学硕士授予单位：；．-Ijt农业大学答辩日期：二。一四年五月二十六日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中

2、特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑j垦壅些盘鲎或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：下幻奠签字日期：弘【叶年箩月弓口日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑宴垦壅些盘鲎有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑皇垦盔些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授

3、权书)学位论文作者签名：下訇茑导师签名：签字曰期：_z夕／垆年5月扣El签字日期：加I呼年S月扣口学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：万方数据摘要对猪脂肪沉积性状候选基因的研究多集中于基因多态性的研究，但由于脂肪沉积性状是数量性状，受控于多基因，各基因在不同时空状态下又受到多级上游基因的调控。因此，研究单个基因并不能全面解释脂肪沉积性状的遗传机理，挖掘影响脂肪沉积的基因，研究诸基因的表达关系成为研究脂肪沉积的关键。本研究基于文献挖掘的方法，以脂肪合成的生物化学过程为基础，确定脂肪酸合成、脂肪酸链的延长和去饱和、三酰甘油的合成三个阶段的催化反应酶及其编码基因，以及己见报道的对

4、上述基因有调控作用的基因，以此构建脂肪合成的分子表达调控网络。本文构建出了以PPARy、I_．,XRa、SREBP-1、ChREBP基因为主干的调控网络。网络中有多条通路可调控FASN、ACC、DGAT、GPAT、A倪等脂肪合成催化酶的编码基因。包括PPA脚_LXRa---*SREBP．1-÷FASN(ACC、Thrsp、S14R)通路，P队研_LXRn_÷ChREBP_FASN(ME、SCDl、Thrsp、ACC、FASN、$14R)通路及其他调控通路。FASN,ACC、DGAT、GPAT、ACSL等催化酶基因处于通路的最下游位置。研究过程中发现，猪脂肪酸链延长过程催化酶的基因调控资料还较少

5、，通过染色体定位结果显示，这些酶的基因位于脂肪合成基因分布相对集中的染色体上，可对这些基因多加以研究，挖掘有利于分子育种的标记基因。本研究对基因FASN,ACACA、Thrsp、ACSLl等脂肪合成的关键基因进行生物信息学分析，通过蛋白质二级结构预测，信号肽、跨膜结构、亚细胞定位、结构域等的预测，为进一步研究提供参考依据。为验证所构建网络的正确性，本研究通过荧光定量PCR对ACACA、Thrsp、ACSLl基因在肝脏、大网膜、背最长肌、肾周、背膘5个组织中的mRNA表达量进行分析，结果显示3个基因的表达趋势表现出很高的一致性，且3个基因存在较强的相关性。大网膜中3个基因各自之间相关性极显著；背

6、最长肌中Thrsp基因与ACSLl基因表达量显著相关；肾周脂肪中Thrsp与ACSLl基因表达量相关极显著。这与构建的网络中Thrsp对ACC的表达正向调控作用一致。相关性的存在是转录调控机制研究的基础，通过本文的研究，可继续进行基因启动子区的研究、转录因子结合位点的研究、DNA和转录因子结合分析等一系列研究，以确定详细的转录调控机制。关键词：脂肪沉积；表达调控网络；生物信息学；转录水平表达万方数据ReconstructionofMolecularRegulatoryNetworkandExpressionAnalysisatTranscriptionallevelofGenesrelated

7、toFatSynthesisPostgraduate：TaoJunMajor：GeneticsD面ection：AnimalGeneticsSupervisor：JiaQingAbs仃actStudyonfatdepositiontraitshasbeenthefoCUSofscholarsofbreeding．Inrecentyears，lookingforcandidategeneofpigf