蛋白激酶c在小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用研究

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1、单位代码：１０４７２学术学位囚专业学位口学号：１２１７００１中图分类号：Ｑ２密级：公开知解｜‘多ｉ硕：ｔ学位论文蛋白激酶Ｃ在小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用研究ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅＣｏｎＯｓ化ｏｂｌａｓｔＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭｏｕｓｅＢｏｎｅＭａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅ化作者姓名：崔阳阳导师姓名：丰慧根教授冯志伟教授学科口类；理学专业名称：生物学培养院系；生

2、命科学技术学院—完成时间：二〇五年兰月ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅＣｏｎＯｓｔｅｏｂｌａｓｔＤ－ｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭｏｕｓｅＢｏｎｅＭａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅ化Ａ了ｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＣｕｉＹａｎａｎｇｙｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＦｅｎＨｕｉｅｎｐｇｇＰｒｏｆ．ＦｅｎｇＺｈｉｗｅｉＣｏｌ

3、ｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期：＞〇ｒ年ｉｒ月ｊ：ｋ）日｜学位论文版

4、权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于＂’（请在Ｗ下相应方框内打小）：１．保密□，在年解密后适用本授权书。２．不保密囚。作者签名：Ｐ０日期女年月：日捧戶｛导师签名：日期｜台：扣；年Ｖ月如日手目录摘要１Ａｂ

5、ｓｔｒａｃｔ３刖胃５機６；炬巧１１淵１９２６结３０参考：＾献３１综述３７附录４８攻读学位期间发表文章情况４９麵５０个人简Ｍ５１新乡医学院硕±学位论文窒白激酶Ｃ在小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中的作巧研究摘要背景一个复杂的调控过程细胞的成骨分化是，涉及很多信号通路的参与。蛋白激酶一ＣｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣＰＫＣ为细胞信号通路中种重要的激酶，可调节细胞的代谢、（ｐ，）生长、增殖和分化等多个生理活动。

6、多项研究表明ＰＫＣ与细胞的成骨分化过程密。ｂｏｎｅｍａ－ｍａｔｅｍ切相关但其是巧在小鼠骨髓间充质干细胞（ｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｌｓｃｅｌｌｓ，ＳＭＳＣｓ）的成骨分化过程中起作用Ｗ及起到什么作用，则很少有人研究。目的本研究旨在探讨不同亚型的ＰＫＣ分子在小鼠ＢＭＳＣｓ成骨分化中所起的作用，Ｗ期可Ｗ为骨质疏松症、骨肿瘤及骨损伤等临床疾病提供新的治疗粗点。方法－１．ＢＭＳＣｓ的成骨诱导：将８０９０％融合度的第３代ＢＭＳＣｓ进行铺板，添加终浓度为５０心１－二钢１

7、００ｎＭ的地塞米松、ｎＭ的抗坏血酸和０ｍＭ的Ｐ憐酸甘油的成骨诱导培养基进行不同时间段的诱导，使ＢＭＳＣｓ在体外向成骨细胞分化；２．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测ＢＭＳＣｓ成骨诱导中不同ＰＫＣ亚型的活化情况并确定ＰＫＣ阻断剂ＧＦ１０９２０３ＸＧＦＸ的最适作用浓度（）；３ＰＣ民ｔｔ－ｔ．采用茜素红染色、实时巧光定量ｕａｎｔｉａｉｖｅｒｅａｌｉｍｅＰＣ民Ｃ（ｑ，巧巧及碱性憐酸酶活性检测实验等多种手段检测ＢＭＳＣｓ的成骨分化情况，并借此确定那个（些）亚型的ＰＫＣ分子参与了对ＢＭＳＣｓ成骨

8、分化的调节。结果１．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹结果显示小鼠ＢＭＳＣｓ成骨诱导过程中ＰＫＣｐＩＩ、ＰＫＣＳ、ＰＫ邱、ＰＫＣＡ均有显著的活化，而ＰＫＣｃｕＰＫＣ０则没有明显的活化Ｃ；２ＰＫＣＦＸ的．Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹结果显示阻断剂Ｇ最适工作浓度为３该浓度下的ＧＦＸ可明显阻断ＢＭＳＣｓ成骨诱导中ＰＫＣｐＩＩ的活化；３．茜素红染色、ｑＰＣ艮及碱性磯酸酶活性检测实验均提示ＰＫ邱ＩＩ