茶树糖类相关基因的挖掘及其在茶树冷驯化中的表达研究

茶树糖类相关基因的挖掘及其在茶树冷驯化中的表达研究

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1、密级:论文编号:中囯农北科学陵学位论文茶树糖类相关基因的挖掘及其在茶树冷驯化中的表达研究CloningandExpressionAnalysisofSugar-relatedGenesduringColdAcclimationinTeaPlant博士研宄生:岳川指导教师:杨亚军研宄员申请学位类别:农学博士专业:鮮研宄方向:茶与靜培养单位:茶叶研宄所研宄生院2015年6月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经

2、发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示f谢意。关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。中国农业科学院博士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目茶树糖

3、类相关基因的挖掘及其在茶树冷驯化中的表达研宄论文作者岳川专业茶学研宄方向茶树资源与育种指导教师杨亚军培养单位(研宄所、中心)茶叶研究所硕(博)职称单位专业导师硕导口评博导口硕导口人博导口硕导口答辩主席博导口高其硕导口生物化学与康研宂员浙江大学博导s/分子生物学骆耀硕导〇/教授浙江大学茶学平博导口余继硕导口研究员杭州茶叶所茶学忠博导口答硕导口成浩研究员中国农科院茶叶所茶学博导f辩硕导口陈亮研究员中国农科院茶叶所茶学博导V委王新硕导w研究员中国农科院茶叶所茶学超博导口员曾建硕导cf研究员中国农科院茶叶所茶学明博导口硕导口

4、博导口会议记录(秘书)论文答辩时间地点2015年5月]9日在茶叶所3号楼4楼中型会议室密级:论文编号:中国农业科学院学位论文茶树糖类相关基因的挖掘及其在茶树冷驯化中的表达研究CloningandExpressionAnalysisofSugar-relatedGenesduringColdAcclimationinTeaPlant博士研究生:岳川指导教师:杨亚军研究员申请学位类别:农学博士专业:茶学研究方向:茶树资源与育种培养单位:茶叶研究所研究生院2015年6月Secrecy:No.ChineseAcademyof

5、AgriculturalSciencesDissertationCloningandExpressionAnalysisofSugar-relatedGenesduringColdAcclimationinTeaPlantPh.D.Candidate:YUEChuanSupervisor:YANGYajunMajor:TeascienceSpecialty:TeaGermplasmandBreedingJune2015摘要糖作为生命有机体的重要能量和物质来源,在植物生长发育及逆境胁迫响应调控中具有重要的作用。逆境胁迫

6、下,植物通过调节体内糖的分配,维持细胞的渗透势、氧化还原水平等的平衡;糖还作为信号分子调控逆境相关基因的转录,从而提高植物对逆境的抵御能力。冷驯化作用诱导茶树中糖的积累,与茶树抗寒能力的提高密切相关。然而,糖的代谢、运输和信号转导受大量酶的调控,从酶学水平上研究糖在茶树抗寒中的作用机制困难较大。前期的研究发现碳水化合物相关基因在茶树冷驯化过程中的表达差异显著。因此,从基因水平上研究糖相关的酶基因的表达调控,有助于进一步揭示糖介导的茶树抗寒响应机理。本研究首先分析了冷驯化作用对茶树中主要糖含量等的影响;其次克隆了茶树中

7、糖代谢、转运及信号转导相关的基因,共72个,对它们的生物信息学进行了详细的分析,并用荧光定量PCR(qRT-PCR)研究了它们在茶树自然冷驯化中的表达模式。为揭示糖介导的茶树抗寒机制研究奠定了基础。主要研究结果如下:1.冷驯化过程中,茶树中的淀粉含量降低,蔗糖、葡萄糖等可溶性糖含量升高,同时脯氨酸和丙二醛等也发生改变,茶树抗寒能力的提高。电镜观察显示,冷驯化对茶树叶绿体结构的影响较明显。淀粉代谢、蔗糖代谢等通路与茶树冷驯化密切相关。2.淀粉代谢与植物抗寒响应密切相关。在淀粉代谢途径中,克隆了茶树中2个淀粉合成酶基因(

8、CsSS3和CsSS4)、9个β-淀粉酶家族基因(CsBAM1-9)、3个α-淀粉酶家族基因(CsAMY1-3),以及麦芽糖转运蛋白CsMEX1基因和麦芽糖转葡萄糖基酶CsDPE2基因。分析了它们的生物信息学特征,荧光定量PCR检测了这些基因在茶树自然冷驯化中的表达模式。冷驯化调控茶树中淀粉代谢相关基因表达,提高β-淀粉酶活性变化。克隆了151

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