莽山烙铁头蛇初毒生物活性的分析(定稿)

《莽山烙铁头蛇初毒生物活性的分析(定稿)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、...页眉莽山烙铁头蛇粗毒的的生物学活性刘宇,聂东宋﹡，吴喆，刘立超，朱政斌(湖南理工学院化学化工系，中国岳阳414000)摘要:　莽山烙铁头蛇是我国濒临灭绝的物种，对其毒素的深入研究可以发现新的生物活性分子和及其的作用机理，也为莽山烙铁头独特的分子进化机制提供理论依据。本文分析了莽山烙铁头蛇毒粗毒对小鼠的半致死量，并采用膜片钳全细胞记录技术,研究了莽山烙铁头蛇毒粗毒对大鼠背根神经节神经元河豚毒素不敏感(TTX-R)钠通道、河豚毒素敏感（TTX-S）钠通道、低电压激活（LVA）电压依赖性钙离子通道和高电压激活（HVA）钙离子通道的作用。结果表明:粗毒对小鼠的半致死量为4.2mg/kg,粗

2、毒对钠通道和钙离子通道作用存在明显差异，10、100、1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒素不敏感(TTX-R)钠电流有抑制作用，而100mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对河豚毒敏感型(TTX-S)钠电流无明显影响;100、1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对HVA型钙离子通道有抑制作用；1000mg/L的莽山烙铁头蛇毒素对LVA型钙离子通道电流峰值的有抑制作用，本研究为莽山烙铁头蛇毒素功能的深入研究奠定了良好的基础。关键词　莽山烙铁头蛇；粗毒；膜片钳全细胞记录；生物学活性。StudyonthebiologicalactivityofcrudevenomfromtheErmiamangs

3、hanensisLIUYu,NIEDongsong﹡,WUZhe,LIULichao,ZHUZhengbin(HunanInstituteofScienceandTechnology;ChemistryandChemicalEngineeringCollege,Yueyang,China,414000)Abstract:Ermiamangshanensissnakeisanendangeredspecies,in-depthstudyonitstoxinscannotonlydiscovernewbiologicallyactivemoleculesanditsmechanism,but

4、alsoprovideatheoreticalbasisforitsuniquemechanismofmolecularevolution.Inthisstudy,thecellpatch-clamptechniquewasuesedtostudythecrudevenomontheeffectofratrootganglionneuronsbackTTX-Rsodiumchannels、TTX-S-typesodiumchannels、CalciumionchannelsHVAtypeandCalciumionchannelsLVAtype.TheResultsshowedthat10

5、,100,1000mg/LofvenomsignificantlyinhibitedTTX-RsodiumchannelandtheHVA-typecalciumchannelinadosedependentmanner;1000mg/LofvenomcaninhibittheLVAtypecalciumchannel....页脚...页眉current，whiletheTTX-Ssodiumchanneltypewasnotinhibited。Keywords:Ermiamangshanensis；crudevenom;whole-cellpatch-clamp;biologicala

6、ctivity本研究受湖南省教育厅科研项目（NO.06C370）、教育厅青年基金项目(NO.07B029)和“湖南省高校科技创新团队支持计划资助”的支助。﹡:通讯作者蛇毒的研究是天然动物毒素研究的一个重要领域，也是潜在的发现新的生物活性分子的重要资源[1]。国内外的研究表明，无论在基础理论还是应用研究上，蛇毒作为新型生物医药的分子模板、神经生物学研究的工具试剂、新型生物杀虫剂的先导分子和蛋白质工程的框架分子等方面的研究均有不可替代的功能[2～4]。莽山烙铁头蛇是是蝰科腹亚科烙铁头蛇属的一个新种,同时也是我国濒临灭绝的物种，根据莽山国家自然保护区陈远辉的调查[5]，目前只在莽山国家自然保护

7、区发现，并且数量只有大概300～500条，目前只有Murakami对莽山烙铁头蛇毒素中的PLA2成分进行了部分研究[6～8]，而对莽山烙铁头蛇毒毒液的生物学功能的研究尚未见报道。本研究对莽山烙铁头蛇毒液的半致死量进行了初步研究，并采用膜片钳全细胞记录技术,研究了莽山烙铁头蛇毒粗毒对大鼠背根神经节神经元TTX-R钠离子通道、TTX-S型钠离子通道、HVA型钙离子通道和LVA型钙离子通道的作用。1材料与方法1.1粗毒与动物莽山烙铁头蛇粗