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时间:2019-03-15
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1、分类号:R446学校代码:10062密级:学号:2010701003硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:糖化血红蛋白五种检测方法的评价TITLEEvaluationofFiveDifferentMethodsforMeasurementofHbA1c一级学科:基础医学二级学科:病原生物学论文作者:田伟指导教师:刘民教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号:R446学校代码:10062密级:学号:2010701003学位类别:科学学位专业学位学科门类:医学硕士学位
2、论文MASTER’SDISSERTATION论文题目:糖化血红蛋白五种检测方法的评价TITLEEvaluationofFiveDifferentMethodsforMeasurementofHbA1c一级学科:基础医学二级学科:病原生物学论文作者:田伟指导教师:刘民教授天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外,论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成
3、果,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文,并编入有关数据库。保密,在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。(请在相对应的方框内打“√”)学位论文作者签名:日期:年月日导师签名:日期:
4、年月日中文摘要目的糖化血红蛋白(glycosylatedhemoglobin,GHb)是糖尿病(diabeticmellitus,DM)患者的诊断、血糖监测和药物治疗效果确定的有效指标之一,临床上常用HbA1c的检测代替GHb。目前,检测HbA1c的方法很多,有高效液相色谱法(highperformanceliquidchromatography,HPLC)、电泳法、亲和层析法、酶法和免疫法等。高效液相色谱法测定HbA1c具有准确性和重复性高的特点,是检测糖化血红蛋白的金标准。本论文将HPLC法
5、和另外四种方法进行比较及分析,为临床医师及各实验室在选择不同方法检测糖化血红蛋白时提供参考。方法实验标本正常对照组65例,其中男33例,女32例,年龄40~57岁,体2重指数18~24kg/m为本院体检无糖尿病的健康者;糖尿病患者64例,其中男233例,女31例,年龄45~66岁,体重指数18~24kg/m。每一份标本在同样条件下用五种方法检测HbA1c,记录测定结果,用于对比分析;选择具有医学决定水平的正常和异常浓度的样本,分别采用5个样本,批内在同一天内重复20次;批间分别在7d内进行10次
6、测试。计算出批内和批间的均值、标准差和CV值。收集HbA1c为10.0%的糖尿病患者的抗凝血,用0.9%的生理盐水进行梯度稀释,从低浓度到高浓度做直线回归分析,观察其线性范围。将HbA1c为10.0%的全血标本用0.9%的生理盐水进行1/5、2/5、3/5、4/5、5/5浓度稀释,分别用五种方法检测其HbA1c浓度,然后分别在血标本中添加56mmol/L葡萄糖、25mmol/L三酰甘油、3.4mmol/L胆红素,并用低温冻融方法制备轻度(Hb<1g/L)、中度(Hb1~4g/L)以及严重溶血标本
7、(Hb>5g/L)分别进行测试。在各种干扰物不同浓度的影响下,如果HbA1c的值上下浮动0.3%,则将视为受到干扰。对比五种方法测定HbA1c的标本量和测定时间,以及回归方程及相关系数。结果五种方法中除外硼酸亲和法,其他四种方法均符合要求;相对而言,HPLC法中D-10型全自动糖化血红蛋白分析仪的精密度更佳。五种方法在4.0%~14.2%范围内线性良好,实测值与理论值的相关系数(r)在0.971~0.996之间,其中HPLC法最好。当加入各种干扰因素时,结果显示HPLC法、酶法、胶乳凝集法测得的
8、HbA1c值上下浮动<0.2%,可见性能稳定、不易受到各种干扰物的影响。电泳法受溶血影响非常大,硼酸亲合法中NycoCardReaderII多功能全定量特种蛋白仪对溶血标本显示浓度太低测不出数,脂血标本显示浓度太高测不I出数。通过标本量、测定时间、CV、r等指标进行比较,得出电泳法所采用的样本量及测定时间均高于其他方法。酶法的r最接近1。结论HPLC法作为金标准,批内和批间精密度在所采用的五种方法中是最好的,其次为酶法和胶乳凝集法,而硼酸亲和法的重复性则相对较差,电泳法结果与实验人员扫描和对电泳
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