福州地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及其基因型与突变的研究

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1、分类号：R392学校代码：10392学科专业代码：100102学号：200803084硕士学位论文福州地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及其基因型与突变的研究TheStudyofocculthepatitisBvirusInfection，genotypeofvirusandmutationamongblooddonorsinFuzhou学位类型：医学硕士所在学院：基础医学院申请人姓名：涂东晋学科、专业：免疫学导师：沈晓丽教授研究起止日期：2011年11月至2015年3月答辩委员会主席：浦晓东教授答辩日期：2015年05月29日二○一五年

2、五月2目录英文缩略词⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141.1主要仪器与试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141.2研究方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182.1福州地区无偿献血者人群OBI流行状况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1

3、82.2OBI样本HBVDNA定量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯192.3HBV的S区基因扩增及序列测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯202.4OBI样本的HBV基因型和S区氨基酸突变分析⋯⋯⋯⋯⋯213讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯533英文缩略词（Abbreviation）英文缩写英文

4、全称中文全称OBIOcculthepatitisBvirusInfection隐匿性乙型肝炎病毒感染HBVhepatitisBvirus乙型肝炎病毒HCVhepatitisCvirus丙型肝炎病毒HIVHumanImmunodeficiencyVirus人类免疫缺陷病毒ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附实验PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应TMAtranscriptionmediatedamplification转录介导的扩增技术NATnucleicacidte

5、st核酸检测技术DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸majorhydrophilicregionMHR主亲水区ddH2Odoubledistilledwater双蒸水bpbasepair碱基对mlmilliliter毫升μlmicroliter微升minminute分钟CtCyclethreshold循环阈值4福州地区献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染及其基因型与突变的研究中文摘要目的：探讨福州地区无偿献血者人群隐匿性乙型肝炎病毒感染（OBI）状况，并对OBI的HBV基因型分布特征与S区氨基酸突变进行分析。方法：应用血清

6、学方法常规筛查HBsAg与核酸检测技术（NAT），对福建省福州市102866例无偿献血者样本进行乙型肝炎病毒（HBV）DNA检测，筛选出HBsAg-HBVDNA阳性样本并判定其感染状态；应用实时荧光定量PCR技术对排除HBV感染窗口期的OBI样本进行HBVDNA检测；S区基因巢式PCR扩增和序列测定；使用MEGA5.0软件进行HBV基因分型和S区氨基酸突变分析。结果：（1）102866例福州地区无偿献血者样本共筛查出75例HBsAg-HBVDNA阳性样本，其中排除HBV血清学标志物乙肝两对半检测结果均为阴性的9例样本，共筛查出OBI样本66

7、例，福州地区无偿献血者人群OBI感染率为0.064%（66/102866）；上海、深圳、厦门、福州等地的OBI感染率不全相同（P<0.001），其中厦门地区的OBI感染率最高（P<0.001），而上海、深圳、福州三个地区的OBI感染率相近(P>0.05)。（2）66例OBI样本中，抗-HBc阳性(伴有或不伴有抗-HBs阳性)的样本共62例，占OBI样本总数的93.9%（62/66）；单纯抗-HBc阳性37例，占56.1%（37/66）；单纯抗-HBs阳性4例，占6.1%(4/66)。（3）66例OBI样本中有12例检出HBVDNA，检出率为

8、18.5%（12/66），样本整体循环阈值（CT值）均在40左右，定量结果显示HBVDNA拷贝数为13～302IU/ml，仅1例样本的HBVDNA定量结果＞200IU/ml，其余