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时间:2019-03-15
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1、硕士学位论文纤维素降解混合菌剂的构建及降解效能CONSTRUCTIONOFCELLULOSE-DEGRADINGCOMPOUNDMICROBIALINOCULUMANDDEGRADATIONEFFICIENCY夏强哈尔滨工业大学2018年06月国内图书分类号:Q939.97学校代码:10213国际图书分类号:579密级:公开理学硕士学位论文纤维素降解混合菌剂的构建及降解效能硕士研究生:夏强导师:宋金柱教授申请学位:理学硕士学科:生物学所在单位:生命科学与技术学院答辩日期:2018年6月授予学位单位:哈尔滨工业大学ClassifiedIndex:Q
2、939.97U.D.C:579DissertationfortheMasterDegreeinScienceCONSTRUCTIONOFCELLULOSE-DEGRADINGCOMPOUNDMICROBIALINOCULUMANDDEGRADATIONEFFICIENCYCandidate:QiangXiaSupervisor:Prof.JinzhuSongAcademicDegreeAppliedfor:MasterofScienceSpeciality:BiologyAffiliation:SchoolofLifeScienceandTech
3、nologyDateofDefence:June,2018Degree-Conferring-Institution:HarbinInstituteofTechnology哈尔滨工业大学理学硕士学位论文摘要纤维素作为储量最丰富的有机生物质,其资源化过程受到广泛关注。研究其科学合理的利用方式既能够实现能量的循环利用,又能得到高附加值产品。目前植物性纤维素的主要利用方式多为物理粉碎或化学焚烧,造成了资源浪费,对环境产生了诸多不利影响。本研究从实验室现有的菌株中筛选出具有纤维素降解能力的微生物,并成功构建了混合菌剂,对纤维素的生物降解利用和环境保护具有
4、积极意义。本文通过刚果红染色实验和FPA酶活测定,筛选出了具有纤维素降解能力的黑曲霉、绿色木霉和地衣芽孢杆菌,在充分考虑菌株之间的共生和互补因素后,成功构建了混合菌剂。经验证,混合菌剂的纤维素各组分酶酶活均高于单一菌株,FPA酶活可达到3.65U/mL。通过单因素试验,选择温度、初始pH、盐度、摇床转速和接种量5个因素对混合菌剂的产酶条件进行了优化,确定最优产酶条件为:温度32℃、初始pH=8.0、盐度1%、摇床转速160rpm、接种量1%。通过正交试验方法,对混合菌剂的菌种配比进行了优化,得到最优配比为黑曲霉:绿色木霉:地衣芽孢杆菌=3:3:2
5、,最大FPA酶活可达到7.01U/mL,是优化前的1.9倍。选择水稻、玉米和小麦3种不同农作物的秸秆为底物,利用范式洗涤法研究了降解前后不同秸秆各组分含量的变化,探明混合菌剂对不同秸秆的降解效能。本研究为农业废弃秸秆纤维素的资源化利用拓宽了渠道,对纤维素降解的工业化具有积极影响。关键词:纤维素降解;混合菌剂;菌种配比;降解率-I-哈尔滨工业大学理学硕士学位论文AbstractCellulose,asthemostabundantorganicbiomass,iswidelyconcernedaboutitsresourcetransformati
6、on.Researchingitsscientificandrationalutilizationmethodscannotonlyrealizetherecyclingofenergy,butalsoobtainhighvalue-addedproducts.Atpresent,themainutilizationmethodsofvegetalcellulosearemostlyphysicalcomminutionorchemicalincineration,resultinginwasteofresourcesandcausingmany
7、adverseeffectsontheenvironment.Inthisstudy,microorganismswithcellulosedegradationabilitywerescreenedfromtheexistingstrainsinthelaboratory,andacompoundinoculumwassuccessfullyconstructed,whichhaspositivesignificanceforthebiodegradationandutilizationofcelluloseandenvironmentalpr
8、otection.Inthispaper,Aspergillusniger,Trichodermaviride,andBacillusl
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