杏鲍菇菌渣纤维素降解菌的筛选、复合菌剂构建及应用

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1、密级：论文编号:中囯农业科学院杏鲍菇菌渣纤维素降解菌的筛选、复合菌剂构建及应用ScreeningofCellulose-degradationBacteriaforPleurotuseryngiiSpentSubstrate,ConstructionandApplicationofCompositeMicrobialSystem硕士研究生：刘晓梅指导教师：胡清秀研究员申请学位类别：理学硕士专业：微生物学研究方向：食用菌培养单位：农业资源与农业区划研究所研究生院2015年5月密级:论文编号:中国农业科学院学位论文杏鲍菇菌渣纤维素降解菌的筛选、复

2、合菌剂构建及应用ScreeningofCellulose-degradationBacteriaforPleurotuseryngiiSpentSubstrate,ConstructionandApplicationofCompositeMicrobialSystem硕士研究生：刘晓梅指导教师：胡清秀研究员申请学位类别：理学硕士专业：微生物学研究方向：食用菌培养单位：农业资源与农业区划研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationScreeni

3、ngofCellulose-degradationBacteriaforPleurotuseryngiiSpentSubstrate,ConstructionandApplicationofCompositeMicrobialSystemMs.Candidate：Liuxiao-meiAdvisor：HuQing-xiuMajor：MicrobiologySpecialty：EdibleFungiMay2015摘要为了利用纤维素降解菌提高食用菌菌渣发酵效果，促进菌渣循环利用，本文从菌渣中采集样品进行微生物分离培养，并通过测定纤维素酶活性，开展

4、了菌渣纤维素高效降解菌的筛选、复合菌系构建及应用研究，并得到以下主要结果：(1)从菌渣中采集样品分离培养，通过刚果红透明圈实验、滤纸条降解试验和纤维素酶活力测定，筛选得到4株纤维素降解能力强的细菌(FB7、CB1、BC11、BC12)，经16SrDNA序列鉴定，FB7、CB1为芽孢杆菌属的2个种、BC12属于丛毛单胞菌属（Comamonassp.）、BC11为白色链霉菌（Streptomycesalbus），其中FB7液体培养4d时，FPA、CMCase、C1、β-Gase的酶活-1-1-1-1性与其他菌株相比最高，分别为22.81U·g、3

5、14.5U·g、2.7U·g、188.09U·g，为筛选到的最优菌株。(2)FB7与BC11、BC12、CB1随机组合，构建11种复合菌剂，经滤纸条降解试验和纤维素酶活性测定，复合菌(CB1+BC11+FB7)在第6d时将滤纸降解成糊状，FPA酶在第3-4d达到最大值-1-1-1131.98U·g，培养第5dCMCase、C1、β-Gase酶的活性为133.61U·g、2.31U·g、217.21U·g。(3)菌渣堆肥中加入复合菌(处理B，CB1+BC11+FB7)和有机发酵菌曲(处理A)堆体的温度上升较快。发酵过程中，加入菌剂的处理A、B的

6、堆体温度高于对照。FPA酶活性在整个发酵过程中均高于CK，说明接种复合菌剂能使堆肥中纤维素酶活性显著提高。对双孢蘑菇产量统计，处理A、B总产量与对照相比略有提高，但差异不显著。(4)利用高通量方法对发酵过程中细菌多样性进行分析发现加入微生物菌剂后可以增加菌渣发酵过程中物种丰富度，改变群落结构组成。处理A、B的香浓指数(Shannonindex)大于对照，表明物种多样性增加。Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)、Acidobacteria(酸杆菌门)、Verrucomicrobia(疣微菌门)、Pla

7、nctomycetes(浮霉菌门)以及Actinobacteria(放线菌门)是3个处理发酵过程中的主要细菌门类，但各类微生物在3个处理中所占比例完全不同。其中，处理A的优势菌是Candidatus_Nitrososphaera、Bacillussp.，处理B和对照的优势菌分别为Pedobacter、Acinetobacter和Comamonas、Candidatus_Xiphinematobacter。关键字：菌渣，纤维素降解菌，筛选，构建，微生物多样性IAbstractThestudyisperformedtosearchefficien

8、tcellulosedegradingmicroorganisms,setupcomplexbacteriaandapplicationtoimproveeffec