犬副流感病毒分子克隆的构建及微型基因组建模

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1、赚论文编号:中囯农业科学院*：T./.学位论文犬副流感病毒分子克隆的构建及微型基因组建橘ConstructionofMolecularCloneandtheMinigenomeofCanineParainfluenzaVirus硕士研宄生：齐宾宾指导教师：刘明研宄员申请学位类别:农学硕士-'专4k：wmm研宄方;：:向：培单位：哈尔滨啓医研宄所研究生院201S年S月•W密级:论文编号:中国农业科学院学位论文犬副流感病毒分子克隆的构建及微型基因组建模ConstructionofMolecularCloneandtheMi

2、nigenomeofCanineParainfluenzaVirus硕士研究生：齐宾宾指导教师：刘明研究员申请学位类别：农学硕士专业：预防兽医学研究方向：动物疫苗及分子免疫学培养单位：哈尔滨兽医研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationConstructionofMolecularCloneandtheMinigenomeofCanineParainfluenzaVirusM.S.Candidate：QiBinbin

3、Supervisor：Prof.LiuMingMajor：PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty:AnimalVaccineandMolecularImmunologyMay2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导麫指导y进行的研宄工怍及*鬌的齋充ii果.尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外•论文中不包含其饱人己经研宂成果.£不&含为P3I中W衣舱科学院或其它教育机构的学位或证书而使用鐵的材料•与我—同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示

4、了谢研究屮答名:时间:yii^HT^2.^关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使弔学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的t印件和磁盘•允作论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复剌乎段保存、，汇编学位论文：卜1..5屮M农业科学院可以用不间方式在不间

5、媒体m抟播嗲位论文的个部或部分内研究生签名：吋间：年s■月2客日11-]!'"]：?0/y-中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文SR犬副流惑病缉计f-克降的构违及微型1因组迂模1

6、论义作者齐宾宾预防⑴研究^向！动

7、物疫苘与分f免疫学^1!!下1指导教师刘明

8、培养中位(研宂所、屮心)哈尔滨粋医研究所

9、姓名职称硕（博）单位，t?业筏名硕导口pnf博狰□硕导口fiif符辩1席W导口♦硬导口nn乐北农业人学项防挎医学博导E硕#□丨师缶//教授东北农业九7颅防涔联学博tE硕渌□A教授•北林收人学M防辫阁学（mm硕导口辩

10、刘_:研究员鈐宪研究所愤防阼K学’1硕导口香mm研究Q哈尔滨涔入研究所__.............Mr—硕导□员卜东农研究员哈尔浪涔矢研究所购，学飞硕导□丨曲絲研究员哈尔滨研究所预防善1M学«导£1pfi^会i义(秘H)

11、絲存论文答辩时N地办2015年S)]28丨丨哈尔滨搿医研究所主楼317室摘要犬副流感病毒（canineparainfluenzavirus,CPIV）是引起犬的自限性气管支气管炎，犬窝咳的主要病因。临床上，CPIV单独感染不引起致死性疾病，只表现为温和的呼吸道症状，而这种情况并不常见；常见的是CPIV与其他病原的混合感染，使病情加剧，大幅度提高死亡率。自1967年首次分离得到该病毒以来，世界各地陆续有相关报道，目前该病毒感染范围已波及全世界，在我国亦出现了普遍流行趋势。在各类病毒疫苗的开发研究中，最为重大的科学进展是反

12、向遗传技术。目前，CPIV的基因工程疫苗尚未见报道，但对人副流感病毒(humanparainfluenzavirus,HPIV)和牛副流感病毒3型(Bovineparainfluenzavirustype3,BPIV3)已有较多的研究。随着负链RNA病毒反向遗传学技术的日趋成熟，副流感病毒（parainfluenzavirus,PIV）作为活病毒表达载体方面有广阔的应用前景，HPIV和BPIV3的现有研究成果对CPIV的研究有借鉴意义。本实验室以构建CPIV的感染性分子克隆为目的。根据GenBank（KC237064.

13、1）中PIV51168-1毒株序列设计引物，应用RT-PCR法对购自ATCC的CPIVHRB-V病毒株分段扩增，克隆到pHW2000载体中并进行测序，经序列拼接获得全基因组序列。与GenBank登录的PIV代表毒株进行对比分析。基因序列分析表明，HRB-V株基因组全长15246nt，含5'-末端、3'-末端和7个ORF，具有PIV