牦牛aqps对高原脑水肿抗性的分子机理

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1、分类号：９５密级Ｑ：公开菊Ｗ才Ｖ掌研究生学位论文？Ｐ＇ｆ耗牛Ａｓ对胃原脑７＿Ｋ肿抗性的々ｓ论文题目Ｑｍ（中文）ＭｏｌｅｃｕｌａｒＭｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＹａｋｇｒｗ巧巧／ｃ打立）ＡＱＰｓｉｎ民ｅｓｉｓｔａｎｃｅｔ：ｏＨｉｇｈＡｌｔｉｔｕｄｅＣｅｒｅｂｒａｌＥｄｅｍａ论文题目（外文）刘健锋研究生姓名生物学■动物学学科、专业神姓物学研巧方向学位级别＾邵宝平副教授导师翅名、职称讼Ｔ作＿；＾口２０１２年０９月至２０１５年０３月起止年月２０１５年０４月论文提交日期

2、２０１５年０５月论文答辩日期２０１５年０６月学位授予日期校址：甘肃省兰州市５Ｗｒ原创性声明本人邦重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或未发表的成果、数据、观点等，均己明确注明出处。除文中己经注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体。已经发表或撰写过的科研成果对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。Ｔｗｇ．Ｉ论文作者签名：：、日期关于学位论文使用授权的声明本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产

3、权归属兰州大学、使用学位论文的规定，同意学校保存或向。本人完全了解兰州大学有关保存国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阁和借阅本人；授权兰州大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用任何复制手段保存和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时一，第署名单位仍然为兰州大学。本学论文研巧内容：＾公开□不宜公开，已在学位办公室办理保密申请，解密后适用本授权书。＂＂一（请在Ｗ上选项内选择其中项打Ｖ）论文作者签名：待导师签名＾＾＾＾！＾占＾方《ＩＬ？日期＇日期；；７々

4、心文兰州大学硕±研究生学位论文巧牛ＡＱＰｓ对高原脑水肿抗性的分子机理巧牛ＡＱＰｓ对离原脑水押抗性的分子化理中文摘要ｒ目的Ｊ一缺氧是许多重大疾病尤其是脑疾病发生发展的主要诱因之，而髙原低氧又－直困扰着青藏高原各种资源的探索、开发及应用。由于青藏高原极端生境的特殊性及低海拔物种的自身适应性，导致快速进入青藏高原的低海拔动物脑的代谢。，极易发生棄乱而形成髙原脑水肿然而到目前为止，人类对青藏高原动物脑水和能量代谢的调控机制及其对离原脑水肿的抗性机制尚且未知。巧牛（ＡｗＴｗｎ一巧ｉｅｗ）作为唯适应青藏高原极端低氧环境的大型哺乳动物，在其高原畜牧生产和高原适应

5、研究中占有极其重要的地位。水通道蛋白（ＡＱＰｓ）中ＡＱＰ４与ＡＰ一Ｑ９是哺乳动物脑中表达最丰富的分子之；其不仅在脑细胞水和能量代谢的运输中发挥着核也作用，而且在脑水肿病理生理过程中也发挥着关键的调控作＂＂レ用。因此，本论文ッ青藏高原巧牛为天然低氧适应模型，Ｗ低海拔黄牛为对照，巧步探讨了青藏高原动物ＡＱＰｓ对高原脑水肿抗性的分子机理。ｒ方法Ｊ１）基因克隆技术；２）生物信息学方法；３）实时巧光定量ＰＣ民技术；４）免疫姐化方法；５）运用国内外文献数据库（如ＰｕｂＭｅｄ、ＣＮＫＩ、Ｇｏｏｇｌｅ）等网＂络资源及相关生物信息学软件，并结含高通量差异表达实验验证，构建了巧牛

6、＂ＡＱＰ４相关高原脑水肿抗性的基因调控网络模型。ｒ结果Ｊ（１）巧牛ＡＱＰ４基因编码区结构：起始密码子为ＡＴＧ，终止密码子为ＴＧＡ，序列长度为％６６３２３，１＜：１＾［６０９４？９９，编码个氨基酸基因登录号为３２；巧牛乂〇基因编码区结构：起始密码子为ＡＴＧ，终止密码子为ＴＡＡ，序列长度为８８５ｂｐ，８２０８３８编码２％个氨基酸，基因登录号为ＫＭ。（２）成功构建了巧牛ＡＱＰ４和ＡＱＰ９全长ＣＤＳ编码序列的真核细胞费光表达质粒ＥＧＦＰ－ＡＱＰ４－和ＥＧＦＰＡＱＰ９。ＰＰ（３）耗牛和黄牛ＡＱＰ４和ＡＱＰ９生物信息学将征比化耗牛与黄牛ＡＱＰ４和ＡＱＰ９

7、氨基酸序列的同源性分别为９９．８％和９９．３％；耗牛和黄牛的ＡＱＰ４间存在１个氨基酸的差异，即耗牛的为丝氨酸（Ｓ）Ａ，而黄牛的为丙氨酸（）：巧牛和黄牛的ＡＱＰ９间存在２个氨基酸的差异，即在第９位上耗牛的为酸性氨基酸谷氨酸（Ｅ）而黄牛的为碱性氨基酸赖氨酸化），在第２７３位置上巧牛的为亮氨酸Ｉ兰州大学硕±研究生学位论文裤牛ＡＱＰｓ对高原脑水肿抗性的分子机理Ｌ）Ｐ）ＡＰ４和ＡＰ９两－（而黄