青藏高原土壤放线菌的多样性及其对三七根腐病的生防潜力

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1、分类号密级公开编号碛士研究被嗲依铪式题百青藏高原土壤放线菌的多样性及其对三七根腐病的生防：学院（所、中心）生命科学学院微生物研究所专业名称生物工郑有坤学号徐丽华职称研究员赵立兴职称副研究员二零一五年五月DiversityofactinobacteriafromtheQinghai-TibetPlateauandtheirbiocontrolpotentialforpathogensofrootrotdiseaseofPanaxnotoginsengAdissertationSubmitedtoYunna

2、nUniversityinfulfillmentoftherequirementfortheawardoftheMaster'sDegreeByYou-KunZhengSupervisedbyProf.Li-HuaXuAssoc.Prof.Li-XingZhaoYunnanInstituteofMicrobiology,YunnanUniversity,Kunming,Yunnan，独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文

3、中不包含其他人或集体已经发表或撰写过的研究成果，对本文的研究做出贡献的集体和个人均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：外凟片日期：论文使用和授权说明本人完全了解云南大学有关保留、使用学位论文的规定，卩：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文和论文电子版；允许论文被查阅或借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密的论文在解密后应遵循此规定）研究生签名：导师签名：日期：本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盘版）电子杂志社进行

4、电子和网络出版，并编入系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。研究生签名：导师签名：日期：从摘要青藏高原是地球上海拔最高的高原，被称为“第三极”。该地区气温极低、养分极度贫乏，生态系统十分脆弱，对全球气候变化极为敏感。尽管青藏高原自然条件恶劣，但在其中栖息着大量的微生物，驱动着整个生态系统的元素生物地球化学循环，对高原生态系统的构建和维持具有极其重要的作用，具有重要的研究价值。但目前对该地区微生物特别是放线菌的研究相对缺乏。本研究通

5、过对青藏高原土壤放线菌的分离，研究其土壤放线菌的物种多样性，并对代表性菌株进行功能基因检测，初步探讨了分离菌株对种三七根腐病病原菌的生防潜力。从青藏高原念青唐古拉山、纳木错、羊卓雍错和高黎贡山采集的土壤中共分离获得放线菌株。通过形态特征和基因序列分析，对分离菌株进行鉴定。结果显示所有菌株分布于目科属，其中包括一些潜在的新分类单元，揭示了青藏高原土壤放线菌的物种多样性和分布规律。选取株代表性菌株进行、和功能基因检测，其中株占至少有个功能基因呈阳性，有株菌、和个功能基因呈阳性，该结果显示这些菌株具有产生活性

6、物质的潜力，可供进一步活性物质的开发研究。采用平板对峙法和琼脂扩散法筛选所有分离菌株的抑菌活性，得到株对种三七根腐病病原菌具有较强抑菌作用的放线菌菌株。这些活性放线菌菌株均具有几丁质酶活性，和基因检测均至少一种呈阳性。结合菌落形态特征和基因序列分析对其进行分类鉴定，它们分别属于土壤诺卡氏菌、直丝紫链霉菌曼尼普尔链霉菌、肉桂链霉菌灰黄拟无枝菌酸菌“和一株潜在新种。本论文结果表明，青藏高原土壤蕴藏着丰富的放线菌资源，在新物种发现、生物活性物质研究和生物防治方面具有很好的应用开发价值。关键词：青藏高原；放线菌

7、；多样性；生防潜力AbstractTheQinghai-TibetPlateau,recognizedas“”，，，，，，，，antagonisticactivitiesagainstthetestfungi.Morphologicalcharacteristicsand16SrRNAsequencesindicatedthatthe11isolatedbelongtoAmycolatopsislurida，，，目录录第一章文献综述放线菌研究概述放线菌研究意义与应用放线菌多样性研究进展青藏高原微生物多样

8、性研究概述土壤微生物的多样性湖泊微生物多样性湿地微生物多样性冰川微生物多样性热泉微生物多样性放线菌生防机制本研究意义与研究内容研究意义主要研究内容第二章青藏高原土壤放线菌的多样性材料与方法土壤样品来源分离培养基放线菌的分离和纯化放线菌的分子鉴定多样性分析结果与分析2.2.1放线菌的分离青藏高原土壤放线菌的物种多样性系统发育分析本章小结第三章青藏高原土壤放线菌的功能基因检测材料与方法菌株来源功能基因扩增结果与分析本章小结第四章三七根腐病生防放