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时间:2019-03-14
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1、分类号密级公开__UDC学号20121013030靑海师苑大学硕古学位论文青藏高原齿虫解化条件与遗传标记开发初探研究生姓名刘海珍,教授导师姓名(职称)都玉蓉宙谱堂份类别理挙硕壬学科专业名称生态学研究方向名称动物生理生态学旅义摇巧日期2015年3月论义答辩日期20巧年6月堂份聘予单份青海师范大学学位授予日期2015年6月答辩委员会主席评阅人妈純,青海师范大学学位论文独创性声明本人声巧所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作
2、及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别^加!乂标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得青海师范大学或其它教一育机狗的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均臣在论文中做了明确的说明并表示了谢意。研究生签拿:日期:青海师范大学学位论文使用授权声明青海师范大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档,可L义采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期巧
3、的保密论文外,允许论文被查阅和借阅,可兴公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。论文的公布(包括刊登)授权由青海师范大学研究生部办理。。,化/./研究生签省:禾1::^^曰期3;|若/导师签名;^^青藏高原齒虫禪化条件与遗传标记开发钥探摘要商虫作为重要的基础实验材料和经济动物资源,研究其解化条件和开发微卫星标记工具具有重要意义。本研究通过对柯柯盐湖面虫卵的僻育实验,探索了柯SCO方法柯盐湖窗虫发育对温度和盐度的耐受条件;基于FIA,构建青藏高原面虫的(AC)n和(AG)n微卫星富集文库,并筛选6对微卫星引
4、物,为窗虫资源评估和遗传分化研巧等提供遗传标记工具。主要研究结果如下:1、25%〇盐度是柯柯盐湖面虫卵脾化和幼体发育的理想盐浓度。在7个盐度梯度中,随着盐度不断升高,柯柯盐湖齿虫卵的解化率平均值呈现下降趋势;但盐度低于25%〇时,面虫卵虽可破膜,但无法发育为无节幼体,是无活为的破膜幼体,而当盐度为80%〇时,面虫将不会解化。°’2、在25%〇盐度条件下,柯柯盐湖面虫卵的最适解化温度为26C,W26C‘为基点,随着温度上升或降低窗虫卵解化率呈下降趋势;当温度上升到巧C或’下降到^3C时,脖化率为0。3、挑取
5、平板上的阳性克隆进行培养,分别从(AC)n文库和(AG)n文库中随机挑选120个和200个白色单菌落.WMl3通用引物和对应探针序列(无生物素标记)进行PC民扩増,分别筛选到80个和120个可能含有微卫星序列的阳性克隆经,测序得到阳性克隆率分别为66.7%、60.0%。4、依据得到的微卫星序列,用Primerpremier5.0软件设计并合成引物632对,对个地理单元(青海、西藏)的18个窗虫基因组DNA扩増,筛选出6对具有多态性的面虫微卫星弓。I物关键词:青藏高原,商虫解化還传标记,IPrelim
6、inarStudyonArtemiaincubationanddevelomentofypgeneticmarkersonArtemiainTibetanplateauAbstractAsakindofimportantexperimentalmaterialandeco打omicanimalresource,l:hestudyon幻isofgreatsignificance.Inthisresearchwestudiedthe,experiment!
7、conditio打sforincubationof口eggsanddeveloppedsixairsofpmt.ltticrosaelliterimersFirst;hesudonheincubationconditionswasmainlp,yyfbcusedon化eidentificationsof化eotimalttttrt.p;emperaureandsaliniyconcenaionSeco打d,Toisola化asetofavailablemic
8、rosateUiteprimers,化e(AC)nand(AG)nmicrosatelliteenrichedlibrariesofartemi
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