银杏内共生真菌的分离及其产黄酮特性的研究

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4、讶签寧疗顯；坦＝＾〇＜／年拜＊抒（＾｜摘要摘要一内共生真菌（Ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃｆｉｍｇｉ），现在的定义是泛指些不引起植物组织明显病害症状一，生活史中的某阶段在植物的组织内生活的微生物，也包括那些对宿主植物哲时没有伤害的潜伏性病原微生物和菌根菌。当研究报道安德鲁紫杉菌一（历，种能产生紫杉醇的内共生真茵，从短叶红豆杉的初皮部中分离得到，这引起了人们研究裸子植物内共生真茵抗肿瘤活性的极大兴一趣。为了解决资源问题，近年来药用植物内生菌成为药用植物新资源研究的的个热点。一０）本文Ｗ我国的特有植物银杏（仿ｎ磅６从瓜ｉＬ．为实验材料，

5、对安徽舒城和合肥地区的银杏的根、茎、叶组织的内共生真菌进行分离，实验采用７５％的己醇对实验材料进行表面消毒，多次重复实验结果表明，银杏不同组织部位的最佳消毒时间分别为：银杏的根为３ｍｉｎ，银杏的茎为２ｍｉｎ，银杏的叶为Ｉｍｉｎ。在此、、条件下，采用尖端挑取的方法，对银杏的根茎叶组织中的真菌进行分离纯化，共得到６０株内共生真菌，根据菌落的形态，颜色进行初步的形态学分析，排除所得的相同菌落，最终获得２０株银杏内共生真菌。通过形态学进行初步鉴定，显微摄影显示内共生真菌在生长过程中的菌丝大都是透明的，并且是无隔的，基本属于单端袍霉属，銷抱属，轮枝抱

6、属这兰大属。本文通过结合显色法、氯化锅比色法、薄层层析法对分离出来的巧共生真菌的发酵产物进行初步的定性分析，从而筛选出可Ｗ产黄丽的茜株。实验表明，若。发酵产物中含有黄丽类物质，则发酵产物与氯化铅反应，部分呈现黄绿色巧光发酵产物与氨氧化钢反应，部分有黄色出现。发酵产物与棚酸反应，部分出现栋黄色。反之则没有此类现象。继而采用超高压液相色谱的方法对产黄爾茜株发醇进行定量分析，从而筛选出具有高产黄丽性能的菌株。实验表明：经过发酵复筛有５株菌株的产黄丽能力超过Ｓｐｇ／ｎｉＬｏ一５实验进步对株高产黄丽的菌株的发酵产物进行了活性鉴定，分别测定了

7、发酵产物对大肠巧菌、枯草芽袍杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果的强弱。实验－Ｉ银杏内共生真菌的分离及其产黄雨恃性的研巧表明．２０１３０５，五种发酵液均有抑菌活性，且ＮＯ１菌株的抑菌效果最佳，后续的实验选Ｎｏ．２０１３０１５为实验茵株。本文最后从发酵培养基和培养条件两方面对实验菌株液体发藤条件进行了探索，得出该系菌株液体发酵产黄砸的最佳条件。实验表明，该系茵种最佳产黄丽发醇培养基条件为：３％葡萄糖、０．５％蛋白膝、０．４％酵母膏、０．３％阻？〇、电４°〇，７０：８．０１％ＭｇＳ４Ｈ２〇；最佳培养