重组菌丝霉素抗菌肽的发酵培养基优化及其在断奶仔猪上的应用效果研究

重组菌丝霉素抗菌肽的发酵培养基优化及其在断奶仔猪上的应用效果研究

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1、.f-舜分类号%16.7:0939.9学号S2013%22禱’'、---f’又。.、毛T^四川农业大学奋、.U?■、'*?户,*.扭一''../,./1专业硕±学位论文勺至,,"重纽菌丝霉素抗菌狀的发醇培养基仇化、及其在断奶仔緒上的应用效果研究:\-‘、华:如、李延一‘14:々?..-■?*>—’、.,指导教师何军研巧员—— ̄乂i'、'《’、、一々一‘去V校外导师晨化博±i。1^

2、fnrIiIT,.么*'■-/中牧实业股倫有限公司Y,.学位类别农业推广硕±索.;:赛处-‘’瀑.r./’.'’-;领域名称养殖:f—’.若作心V?、.、户-..-一、典-研巧方向猪的营养.?-.?‘、方^一、—庐■、三.’.'占*—.^-嗦業舞W产r.、I^^^-^、、、>:,20155*‘,月.年、,二一-,严^'V‘:、-‘.乂、.--.w..4/>..’‘分'

3、如..'兵.^與、V'?I‘^■’’.,/.-‘La:..'\、..SichuanAriculturalUniversitgyMasterDereeThesisgOmizedroductionofRecombinantp村pPlectasinfromPichiaastorisandeffectsofthepplectasinonerformanceofweaninispgpg乂u化or:YanLiSupervisor:Prof

4、.JunHeInstituteof乂nimalNutrition,Sichuan乂griculturalUniversity^YaanSichuanProvincePRChina,,May,2015本研究由公益性行业(巧业)科研专项201403047()教育部长江学者和削新团队发展计划(NO.IRT13083)资助特致感谢!论文独倒巧寅明本人郑重声明:所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研充工作所取得的成果。尽我所知,除了文中特别加标注和致谢的地

5、方外,学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:^年各月句^日h^关于论文使用授巧的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定,目P;学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅,可^采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可用不同方式在不同媒

6、体上发表。、传播学位论文的全部或部分内容王研究生签名:年^月曰^导师签名:(?^么年^月曰:摘要一菌丝霉素是种从腐生子囊菌中分离出的防御素类抗菌化,具有抗革兰氏阳性菌的作用,。为实现其廉价生产本实验室在前期研究中构建了重组菌丝霉素基因工一程菌PP]e为进,本研究利用30L:();步提高其表达水平发酵罐筛选了最适培养基在此基础上,评价了重组抗菌化在断奶仔猪上的应用效果,期为菌丝霉素抗菌狀在饲料工业中的推广应用积累资料:。主要研究内容及结果如下一试验:重组菌丝霉素抗菌肤发酵培养基优化及其体外抑菌效果

7、的研究■30Le-发酵罐对工程菌PP,,试验利用l进行液体发醇采用分批补料式发酵工艺比较甘油低盐、甘油基础盐和可溶性淀粉基础盐H种不同培养基对重组菌丝霉素抗-菌化分泌表达的影响,SDSPAG目。采用考马斯亮蓝法检测发酵上清液总蛋白通过检测重组抗菌狀的表达形式,结合平板抑菌试验考察重组抗菌化体外稳定性和抑菌效果,。结果表明:发酵到114h甘油低盐组、甘油基础盐组和可溶性淀粉基础盐组/L402L277/菌体湿重达到最高,分别为450g,g/,gL。发酵114h,测得甘油低盐组:〇.375/U甘油基础盐组3.9

8、41/L可溶性淀粉基础盐组:发酵上清液蛋白总浓度g:g5.63g/L。体外抑菌结果思示:通过酸、胃蛋白酶和膀蛋白酶处理之后,重组菌丝霉素抗菌狀对金黄色葡萄球菌有较强抑菌效果。上述结果表明:通过优化培养基,提高

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