蕲蛇dna检测试剂盒的评价与应用

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1、分类号：R282.5单位代码：10201研究生学号：20121007005密级：公开北华大学硕士学位论文蕲蛇DNA检测试剂盒的评价与应用EvaluationofAgkistrodonDNAKitandSurveyingoutQualitiesfromCommercialSample作者姓名：于文静专业：药物分析研究方向：中药DNA指纹技术研究与应用指导教师：张丽华教授培养单位：药学院2015年5月蕲蛇DNA检测试剂盒的评价与应用EvaluationofAgkistrodonDNAKitandSurveyingoutQualitiesfromComm

2、ercialSample作者姓名：于文静专业名称：药物分析学指导教师：张丽华学位类别：医学硕士答辩日期：2015年5月20日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用(但纯学术性使用不在此限)。否则，应承担侵权的法律责任。北华大学硕士学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的

3、作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：2015年5月20日《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿声明研究生院：本人同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》出版章程的内容，愿意将本人的学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）电子杂志社的《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿，希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和CNKI系列数据库中使用，同意按章程规定享受相关权益。论文级别：■硕士□博士学

4、科专业：药物分析论文题目：蕲蛇DNA检测试剂盒的评价与应用作者签名：指导老师签字：2015年5月20日蕲蛇DNA检测试剂盒的评价与应用摘要目的：研制中药材蕲蛇DNA检测试剂盒，对试剂盒进行评价，并对市售蕲蛇药材进行质量考察，为蕲蛇在中药源市场的开发与应用提供质量控制的准确与快速的分子生物学方法。方法：1.以中国药典（2010增补版）蕲蛇DNA检测方法为基础并改良，研发从DNA提取，PCR扩增及鉴定等标准试剂，组装成DNA检测试剂盒；2.随机抽取北京、天津、长春和吉林四个城市18个蕲蛇样品，采用试剂盒和药典方法进行检测，比较检测结果。3.对试剂盒的特

5、异性、稳定性、敏感性和重复性进行质量评价。4.试剂盒送中国食品与药品检定研究院复审。结果：1.采用研发的蕲蛇DNA试剂盒与药典法对市场抽查蕲蛇样品进行平行检验，18个样品中14个样品为正品，4个样品为不合格品，合格率为77.8%。对比试剂盒法与药典法检测结果，结果完全一致。2.蕲蛇DNA检测试剂盒经反复冻融20次后依然有效。试剂盒的最低检测样品量为0.025g，3次重复性检测均可完全重现相同结果。试剂盒与药典法检测结果一致，特异性为100%。3.试剂盒在中国食品与药品检定研究院进行复审，实验所用8个蕲蛇正品，20个伪品中特异性为100%。结论：研发

6、的蕲蛇DNA检测试剂盒对蕲蛇药材鉴别准确有效，并且与药典法相比更加简单、快捷。同时，DNA检测试剂盒法为中药源市场动植物药材的种间鉴别提供了新的途径，特别是在甄别名贵中药材真伪方面，I更具有广阔的应用前景。关键词：试剂盒，PCR，蕲蛇IIEvaluationofAgkistrodonDNAKitandSurveyingoutQualitiesfromCommercialSampleAbstractOBJECTIVE:TodevelopakindofAgkistrodonDNAtestkit,andevaluatetheaccuracyindexes

7、,andsurveyoutthequalitiesfromcommercialAgkistrodonsamples.ProvideaaccurateandrapidmolecularbiologyofqualitycontrolmethodappliedtodevelopmentandapplicationoftraditionalChinesemedicinemarket.METHODS：1.TheAgkistrodonDNAtestkitwasdevelopedandmodifiedaccordingtothemethodrecordedinP

8、harmacopoeia(2010edition),researchthestandardreagentsofDNAext