快速dna提取检测试剂盒

《快速dna提取检测试剂盒》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、杭州新景生物试剂开发有限公司区地址：浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编：310030电话：0571-87381295传真：0571-87381297快速DNA提取检测试剂盒产品组成快速DNA提取检测试剂盒Cat.No.50次制备4005050200次制备4005200样本裂解液蛋白酶K贮存液2×PCRMixddH2O研磨棒说明书12ml500µl500µl500µl5个1份12ml×41ml×21ml×21ml×25个1份产品储存与有效期-20℃储存，有效期为两年以上；如果频繁使用，建议储存于2~8℃保存，有效期为6个月。技术支持

2、杭州新景生物试剂开发有限公司研发部：e-mail:technical@simgen.cn,电话：400-0099-857。产品介绍本试剂盒试剂盒包含了快速制备DNA和PCR扩增的所有试剂，可在20分钟内从植物组织、种子、细菌和动物组织样本中一步法提取总DNA并用于PCR扩增。整个提取过程无需有机溶剂抽提，无需无水乙醇沉淀，简便、快捷，而且质量稳定可靠。本试剂盒提供的2×PCRMix是一种优化的两倍浓度的PCR预混合液，TaqPlusDNA聚合酶、PCR增强剂和蛋白稳定剂协同提高了PCR效率和灵敏度，非常适合低拷贝模板扩增，特别适合于高通量的筛选。用户

3、需自备的试剂与物品1．1.5ml离心管、移液器吸头、一次性手套及防护用品2．台式小量离心机（可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子）3．旋涡震荡器、水浴锅或干浴锅使用前准备1．如果离心机有制冷功能，请将温度设置到25℃。2．将水浴锅或干浴锅温度设置到56℃和95℃。3．收集样本：植物材料：称取约10mg组织放入离心管中，用研磨棒旋转挤压组织，使其成匀浆状（如果需要更多研磨棒，可以拨打400-0099-857咨询购买）；如果是植物种子，应事先破碎并研细；动物材料：用手术刀将组织剁成匀浆状，称取约10mg组织匀浆放入于离心管中；细菌：取菌液200-

4、800μl，12000rpm离心30秒收集菌体；www.simgen.cn仅供科研使用，请勿用于人体及动物的治疗或临床诊断。Ver.3杭州新景生物试剂开发有限公司区地址：浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编：310030电话：0571-87381295传真：0571-87381297操作步骤1.加入200μl裂解缓冲液，涡旋振荡直至组织匀浆或菌体彻底悬浮分散开来。2.加入10μl蛋白酶K贮存液，涡旋振荡混合均匀，56℃孵育10分钟。3.低速离心数秒使离心管管盖上的液体沉降到管底，然后95℃处理5分钟。*低速离心数秒的步骤不可省略，否

5、则管盖上残留的蛋白酶K未经95℃失活，可能影响后续的PCR扩增。4.最高速（≥13,000rpm）离心5分钟。5.吸取150μl上清转移至一个洁净的1.5ml离心管，作为模版直接用于PCR扩增或-20℃贮存备用。6.PCR扩增：2×PCRMix正向引物（10µM）反向引物（10µM）模板ddH2O10µl0.5µl0.5µl2µl7µlTotal20µl7.手指轻弹PCR反应管充分混匀，简短离心。8.PCR反应循环设置举例94℃3min94℃30sec※55℃30sec35Cycles§72℃1min72℃5min※以实际最佳退火温度为准。§以1kb

6、/min计算。对于扩增300bp以下的目的片段，可用两步法扩增，以节省扩增时间：94℃3min94℃20sec35Cycles60℃1min72℃5min9.结果检测：取5-10µl扩增产物直接进行琼脂糖电泳检测。*琼脂糖凝胶浓度与线形DNA最佳分辨范围的关系：琼脂糖浓度最佳线形DNA分辨范围0.5%0.7%1.0%1.2%1.5%2.0%1,000~30,000800~12,000500~10,000400~7,000200~3,00050~2,000www.simgen.cn仅供科研使用，请勿用于人体及动物的治疗或临床诊断。Ver.3