快速dna提取检测试剂盒

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1、杭州新景生物试剂开发有限公司区地址:浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编:310030电话:0571-87381295传真:0571-87381297快速DNA提取检测试剂盒产品组成快速DNA提取检测试剂盒Cat.No.50次制备4005050200次制备4005200样本裂解液蛋白酶K贮存液2×PCRMixddH2O研磨棒说明书12ml500µl500µl500µl5个1份12ml×41ml×21ml×21ml×25个1份产品储存与有效期-20℃储存,有效期为两年以上;如果频繁使用,建议储存于2~8℃保存,有效期为6个月。技术支持杭州新景生物试剂开发有限公司研

2、发部:e-mail:technical@simgen.cn,电话:400-0099-857。产品介绍本试剂盒试剂盒包含了快速制备DNA和PCR扩增的所有试剂,可在20分钟内从植物组织、种子、细菌和动物组织样本中一步法提取总DNA并用于PCR扩增。整个提取过程无需有机溶剂抽提,无需无水乙醇沉淀,简便、快捷,而且质量稳定可靠。本试剂盒提供的2×PCRMix是一种优化的两倍浓度的PCR预混合液,TaqPlusDNA聚合酶、PCR增强剂和蛋白稳定剂协同提高了PCR效率和灵敏度,非常适合低拷贝模板扩增,特别适合于高通量的筛选。用户需自备的试剂与物品1.1.5ml离心管、移液器吸头、一次性手

3、套及防护用品2.台式小量离心机(可配离心1.5ml离心管和2ml离心管的转子)3.旋涡震荡器、水浴锅或干浴锅使用前准备1.如果离心机有制冷功能,请将温度设置到25℃。2.将水浴锅或干浴锅温度设置到56℃和95℃。3.收集样本:植物材料:称取约10mg组织放入离心管中,用研磨棒旋转挤压组织,使其成匀浆状(如果需要更多研磨棒,可以拨打400-0099-857咨询购买);如果是植物种子,应事先破碎并研细;动物材料:用手术刀将组织剁成匀浆状,称取约10mg组织匀浆放入于离心管中;细菌:取菌液200-800μl,12000rpm离心30秒收集菌体;www.simgen.cn仅供科研使用,请

4、勿用于人体及动物的治疗或临床诊断。Ver.3杭州新景生物试剂开发有限公司区地址:浙江省杭州市西湖科技经济园金蓬街366号1幢东4F邮编:310030电话:0571-87381295传真:0571-87381297操作步骤1.加入200μl裂解缓冲液,涡旋振荡直至组织匀浆或菌体彻底悬浮分散开来。2.加入10μl蛋白酶K贮存液,涡旋振荡混合均匀,56℃孵育10分钟。3.低速离心数秒使离心管管盖上的液体沉降到管底,然后95℃处理5分钟。*低速离心数秒的步骤不可省略,否则管盖上残留的蛋白酶K未经95℃失活,可能影响后续的PCR扩增。4.最高速(≥13,000rpm)离心5分钟。5.吸取1

5、50μl上清转移至一个洁净的1.5ml离心管,作为模版直接用于PCR扩增或-20℃贮存备用。6.PCR扩增:2×PCRMix正向引物(10µM)反向引物(10µM)模板ddH2O10µl0.5µl0.5µl2µl7µlTotal20µl7.手指轻弹PCR反应管充分混匀,简短离心。8.PCR反应循环设置举例94℃3min94℃30sec※55℃30sec35Cycles§72℃1min72℃5min※以实际最佳退火温度为准。§以1kb/min计算。对于扩增300bp以下的目的片段,可用两步法扩增,以节省扩增时间:94℃3min94℃20sec35Cycles60℃1min72℃5m

6、in9.结果检测:取5-10µl扩增产物直接进行琼脂糖电泳检测。*琼脂糖凝胶浓度与线形DNA最佳分辨范围的关系:琼脂糖浓度最佳线形DNA分辨范围0.5%0.7%1.0%1.2%1.5%2.0%1,000~30,000800~12,000500~10,000400~7,000200~3,00050~2,000www.simgen.cn仅供科研使用,请勿用于人体及动物的治疗或临床诊断。Ver.3

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