胰石蛋白减轻胰腺星状细胞对胰岛β细胞的毒性效应

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1、乘兩大聲硕±学位论文巧石蚕白减轻巧麻星状细胞对族岛目细胞的毒性效应专业名巧：内分證及化谢性疾巧学研究生巧名：王魚导师姓名：抓子林ＴＨＥＥＦＦＥＣＴＯＦＰＳＰ／ＲＥＧＩＮＰ’ＳＣＳＢＥＴＡＣＥＬＬＴＯＸＩＣＩＴＹＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒｔｈｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅｇＢＹＹｉｎｇＷａｎｇＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＺｉｌｉｎＳｕｎＳｏｕｔｈｅ

2、ａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＡｐｒｉｌ２０１５东南大学学位论文巧创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，，。尽我所知除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均己在。与我论文中作了明确的说明并表示了谢意。－研究生签名；日期：—、如雄Ｉ东南大学学位论文使用巧权声明东南大学、中国科学技术信息研巧所、国家图书馆有权保留本人所送

3、交学位论文的复印件和电子文档，可采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子一文档的内容和纸质论文的内容相致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查陶和借阅＾１，可（＾公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。论文的公布（包括刊登）授权东南大学研究生院办理。＾＇＇厂＇（研巧生签名；４瞒－导师签日期：／中文捆要肤石蛋白减轻族腺星状细胞对巧岛Ｐ细胞的奉性效应巧要背巧及目的病理研巧显示，２型糖尿病膀岛内存在纤维化，膜腺星状细胞是膜岛纤维化的主要始动和效应巧施，并且对膜岛Ｐ细胞具有直接损伤作用。肤石蛋白／再

4、生蛋白（Ｐａｎｃｒｅａｔｉｃｓｔｏｎｅｐｒｏｔｅｉｎ／ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ，ＰＳＰ／ｒｅｇ）是再生基因一，家族的重要成员之，与膀腺细胞的増殖密切相关。有研巧显示该蛋白促进膜岛细胞増殖及功能，并且可抑制族腺星状细胞活化及其致纤维化能力Ｐ。本实验探讨ＰＳＰ／ｒｅｇ对膜腺星状细胞（ＰａｎｃｒｅａｔｉｃＳｔｅｌｌａｔｅＣｅｌｌ，ＰＳＣ）膀岛Ｐ细胞毒性效应的影响。方法分离培养美国癌症研究所（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＣａｎｃｅｒＲ的ｅａｒｃｈ，ＩＣＲ）小鼠的巧Ｃ，在含或不含有ＰＳＰ／ｒｅｇ的培养液中

5、培养２４小时，收集ＰＳＣ上清（ＰＳＣｓｕ－Ｍ－ｐｅｍａｔａｎｔＰＳＣＳＮ），ＩＮ６；①无血清培养基、，将小鼠膀岛ｐ细胞株分别培养在③含０／３０／００／２００／３００ｎ／ｍｌＰＳＰ／ＳＣ－ＳＮ、ＳＰ／１ｇｒｅｇ的无血清培养基、③Ｐ④Ｐｒ－－－ＳＣ－ＳＮ（ＰＳＰＰＳＣＳＮ）、⑤含有００ｎ／ｍｌＰＳＰ／ｒｅＳＣＳＮ（ＰＳＰ干预的Ｐ１ｇｇ的Ｐ巧＋ＰＳＣ－Ｎ－Ｓ）中２４小时。ＣＣＫ８比色法观察不同化理组小鼠膀岛ｐ细胞存活率；ｅ－流式细胞术检测ＡｎｎｘｉｎＶＦ打Ｃ＆ＰＩ双染细胞比例：葡萄糖刺激的膜岛素释放

6、（Ｇｕｃｏ化Ｓｍｕｌｉ）上ｌｔｉｌａｔｅｄＩｎｓｕｎＳｅｃｒｅｔｉｏｎＧＳＩＳ；膜岛素ＥＬＩＳＡ试剂盒检测，试验清膜岛素浓度；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测Ｐ拍、ＬＣ３Ｍ虽白的表达。结果－组ＭＮ－１．ＣＣＫ８法检测ＰＳＰ／ｒｅｇ６小鼠膜岛Ｐ细胞活力百分比高于对照组，ｍ－流式细胞术分析结果显示两组ＡｉｅｘｉｎＶＦＩＴＣ＆ＰＩ双染细胞比例无明显差异，ＧＳＩＳ试验结果显示ＰＳＰ／ｒｅｇ组荀萄糖刺激的肤岛素释放浓度高于对照组，ＷＢ检测ＰＳＰ／ｒｅｇ姐Ｐ纪蛋白含量低于对照姐、ＬＣ３Ｍ比值高于对照组；－－２－．

7、ＣＣＫ８法检测ＰＳＣＳＮ组ＭＩＮ６小鼠族岛Ｐ细胞活力百分比低于对照组，－组Ａ－流式细胞术分析结果显示ＰＳＣＳＮｉｍｅｘｉｎＶＦＩＴＣ＆ＰＩ双染细胞比例高于对照－Ｎ沮葡萄糖刺激的膜岛素Ｉ，組，ＧＳＳ试验结果显示ＰＳＣＳ释放浓度低于对照组ＷＢ检测ＰＳＣ－ＳＮ组Ｐ６２蛋白含量低于对照组、ＬＣ３ＩＩ／Ｉ比值高于对照组：３ＣＣＫ－－ＰＳＣ－组ＭＩＮ－百分比高于．８法检测ＰＳＰＳＮ６小鼠膜岛Ｐ细胞活力－－－ＰＳＣ－ＳＮ组ＰＳＣ，流式细胞术分析结果显示ＰＳＰＳＮ组ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ＆ＰＩ双染Ｉ东南大学硕±学位论文

8、－ＳＣ－ＳＮ－细胞比例低于Ｐ组，ＧＳＩＳ试验结果湿示ＰＳＰＰＳＣＳＮ组葡萄糖刺激的膀－－－岛素释放浓度高于ＰＳＣＳＮ组，ＷＢ检测ＰＳＰＰＳＣＳＮ组