瘦素与脂联素在东北林蛙输卵管中的季节性表达

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1、ｔＳＴＲｙ密级ＵＤＣ？Ｉ）ｗＴＨＥＳＩＳ：＾ｆＬｎ￡文瘦素与脂联素在东北林蛙输卵管中的季节性表达）（中文题名ＳｅａｓｏｎａｌＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＬｅｐｔｉｎａｎｄＡｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎｉｎｔｈｅＯｖｉｄｕｃｔｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｂｒｏｗｎｆｒｏｇＲａｍｄｂｏｗｓｋｉｉ（ｙ）（英文题名）刘豫宁（作糖名）翁强教授指导教Ｉ而申请学位级别硕士、生动植物保护与利用学科？丨卩名研究方向野生动物生殖生理学‘论文提夺日期２０１５

2、年４月论文答辩日期２０１５年６月学位授予日期答辩委员会主席：评阅人：此索林▲大学硕士论文同意发表的声明研究生院：本人及导师完全同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库“”出版章程》（以下简称章程）及我校与中国学术期刊（光盘版）电子杂志社签定的《ＣＮＫＩ共建共享中国优秀博硕士学位论文全文数据库（ＣＤＭＤ）和北京林业大学研究生院博硕士学位论文全文数“”据库（ＤＭＤ）协议书》（以下简称协议书）的有关内容，愿意将本人的硕士学位论文委托研究生院向中国学术期刊（光盘版）电子杂志社的

3、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》投稿。所在学科为：野生动植物保护与利用，论文题目为：瘦素与脂联素在东北林蛙输卵管中的季节性表达。希望《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》给予出版，并同意在《中国博硕士学位论文评价数据库》和ＣＮＫＩ系列数据库中使用，同意按章程和协议书规定孚受相关权益。作者签名：务嫩导师签名：乂年６月＆曰永久联系地址：（邮编）永久联系电话：注：《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》可从ｈｈｆｕｄｕ：／ａｄｕａｔｅ，．ｅｕ．ｃｎ／ｐ／ｇｒ．ｊ中学位工作

4、学位论文栏目下浏览独创性声明……本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下（或我个人）进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得北京林业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。ｑ‘〈！像５日期签名：：ｏＵ卜关于论文使用授权的说明本人完全了解北京林业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的

5、复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵守此规定）签名、外：导师签名：＆日期：斗ｆ■翁ｍ摘要一东北林娃，是分布于我国东北地区的种重要的两栖类经济动物，其在冬眠前期特异性膨大的输卵管晒干后可制成著名中药“”性林娃油，而其输卵管在冬眠前期特异膨大的生理学现象的机理尚不清楚。冬眠前膨大的东北林蛙输卵管中富含脂质，为冬眠中的机体提供能量。近年来的研究发现，瘦素和脂联素，作为脂肪分泌的两种重要激素，具有

6、调控摄食、能量代谢、生长发育和生殖等多种生物学功能。本项研宄的目的是以野生雌性东北林娃为研究对象，调查瘦素和脂联素在东北林蛙输卵管中表达位置及表达水平的季节性变化，评价瘦素和脂联素在东北林蛙输卵管季节变化中的调节４１作用。实验材料采样于我国东北吉林省吉林市，分别于月繁殖期与０月冬眠前期采集野生雌性东北林蛙，获得输卵管组织，进行形态组织学观察，免疫组织化学，免疫印迹，ＥＬＩＳＡ与实时定量ＰＣＲ实验。实验结果显示：（１）形态组织学结果显示东北林娃输卵管的重量与周径大小从繁殖期至冬眠前期显著上升，东北林蛙输

7、卵管的组织结构呈现显著的变化；输卵管的组织学结果显示冬眠前期输卵管的點膜上皮细胞少纤毛，固有层管状腺体积大，腺细胞界限模糊，而繁殖期却与之相反，表现为點膜上。皮细胞多纤毛，固有层管状腺体积小（２），腺细胞界限清晰东北林蛙输卵管中ＰＣＮＡ与ＰＰＡＲｙ２的免疫组织化学显示两个时期输卵管均有表达；免疫印迹结果显示ＰＰＡＲｙ２在冬眠前期输卵管中的免疫活性显著高于繁殖期，而ＰＣＮＡ没有明显变化。（３）在繁殖期与冬眠前期的东北林蛙输卵管中，瘦素的免疫定位在林蛙输卵管的點膜上皮细胞，而瘦素受体定位在固有层腺细胞

8、；免疫印迹结果显示在冬眠前期输卵管中的瘦素与瘦素受体的免疫活性显著高于繁殖期；ＥＬＩＳＡ结果显示冬眠前期的输卵管总蛋白瘦素的含量高于繁殖期；瘦素受体的实时定量ＰＣＲ结果也显示了瘦素受体ｍＲＮＡ的表达量相对于繁殖期，在冬眠前期有显著提升。脂联素与其受体在两个时期的输卵管均有阳