甘蓝小孢子培养及其倍性鉴定方法研究

《甘蓝小孢子培养及其倍性鉴定方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文甘蓝小孢子培养及其倍性鉴定方法研究StudyonMicrosporeCultureandMethodsofPloidyIdentificationofPlantletsinCabbage(BrassicaoleraceaL.var.capitata)祁魏峥指导教师姓名郁继华教授（甘肃农业大学兰州730070）康俊根研究员（北京市农林科学院蔬菜中心北京100097）学科专业名称设施作物研究方向设施蔬菜栽培生理与生长调控论文答辩日期2015年5月

2、27日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席王刚教授评阅人张恩慧教授司怀军教授2015年5月甘肃农业大学2015届硕士学位论文摘要甘蓝是我国广泛种植的主要叶菜类蔬菜作物之一，年播种面积达90万公顷以上。在常规育种进程中，甘蓝属于典型的绿体春化型两年生作物，难以加代繁殖，育种周期较长，一般自交系纯化至少需6年以上；快速有效地获得稳定的纯合体可以大大缩短其育种年限，提高育种效率，而通过小孢子培养技术可以在两年内达到这一要求。通过游离小孢子培养获得的再生植株拥有自然加倍的能力，基因型不同，再生植株的倍性

3、及其所占比例不尽相同，为育种的需要，需要对再生植株进行倍性鉴定，为后期植株的人工加倍提供依据。本实验以108个甘蓝品种为材料，对其小孢子进行游离培养获得大量的胚状体和再生植株，并从表型分析植株特性，以此来研究甘蓝小孢子胚胎形成的外在影响因素；通过流式细胞技术、甘蓝叶片气孔大小及气孔保卫细胞周围叶绿体数目的规律等来探讨鉴定倍性有效性的方法。获得主要结果如下：（1）初步探讨了在单倍体育种实验中甘蓝表型性状对胚胎生成的影响，在表型与胚胎生成的结果分析上，发现早熟、球形、春甘蓝的出胚比例均在50%以上；中熟

4、品种的甘蓝出胚个数占所有中熟品种的10%，晚熟品种的甘蓝共15种，均未出胚，出胚的扁球品种个数占所有扁球品种的6.25%，8种越冬甘蓝均没有出胚。具有圆球、早熟、春甘蓝这三个特性的甘蓝品种易出胚，而扁球、中熟、晚熟以及越冬甘蓝不易出胚。（2）由甘蓝小孢子中获得的再生植株的平均自然加倍率为27.12%，整体较低。且自然加倍率因基因型的不同而有较大差异。（3）通过对从甘蓝作物游离小孢子中获得的不同倍性的再生植株的气孔保卫细胞叶绿体数目的研究，获得了一种简便的鉴定甘蓝植株倍性的方法。所得的不同倍性的再生植

5、株叶片保卫细胞周围叶绿体平均个数范围规律为：单倍体6-9个，二倍体9-12个，四倍体12-23个，且随着倍性的增加，叶绿体个数分布范围更加广泛。在实际操作中，根据显微镜中观察到的叶绿体个数，可以更加直观的进行判断。（4）不同倍性的保卫细胞长度变化范围为：单倍体18-23μm，二倍体25-35μm，四倍体35-45μm。保卫细胞周长变化范围为：单倍体60-75μm，二倍体75-95μm，四倍体100-115μm。保卫细胞宽度随气孔大小变化而差异较大，规律不明显。在保卫细胞长度和周长均能说明倍性的情况下

6、，显然，通过测量保卫细胞的长度来判定倍性的方法更为I甘肃农业大学2015届硕士学位论文简便。关键词：甘蓝；游离小孢子培养；叶绿体；气孔保卫细胞；倍性鉴定II甘肃农业大学2015届硕士学位论文AbstractCabbage（Brassicaoleraceavar.capitata）isoneoftheimportantvegetablecropsinChina,withaplantedareaof90,0000hectares.Intheprocessoftheconventionalbreeding

7、,Cabbagebelongstoatypeoftypicalgreenbodyvernalization,it’sdifficulttoaddgenerationreproductionanditsbreedingcycleistoolong,generalspeaking,thepurificationofinbredlinestakestimeofatleast6years.Toobtainstablehomozygotequicklyandefficientlycanshortenthebr

8、eedingcyclegreatlyandimprovedtheefficiencyofbreeding,Themicrosporeculturetechnologycanachievetherequirementintwoyears.regenerationplantofisolatedmicrosporehasthenaturaldoubleability.Thereweregreatdifferencesamongtheploidyofregenerationp