猪转铁蛋白受体与ppv-vp2相互作用的初步研究

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1、密级:论文编号:中囯农他科学院学位论文猪转铁蛋白受体与PPV-VP2相互作用的初步研究PreliminarystudyoninteractionbetweenPorcineTransferrinReceptorandPPV-VP2硕士研究生：：王麻^指导教师：崔尚金研宄员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：哈尔滨兽医研究所研宄生院2015年5月独创；I、生声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导F进行的研究丁作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特別加以标注和致谢的地4外，论文屮+包含艿他人己行友表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得屮国农收科嚅院成其它教育机构的学位或

2、ilK书而使用过的材料。与我-.N丨:作的丨"U;对本研宂所做的仟何贡献均己在论文中作r明确的说明并表示了谢怠。研宄生签名：三版>爽吋间：年4门I丨I关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用學位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被査阅和借阅，…以采用影叩、缩印或扫描等复制手段保存、I:编学位论文。同意屮国农业科学院吋以用个丨1彳方式同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内荇。研究生签名：玉9^t时间：年4月X日中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表检测猪转铁蛋白受体的SYBRGreen荧光定量PCR方法论文题目及稳

3、定表达猪TfR的HEK293细胞系的建立动物传染病及其病论文作者王晓玲专业兽医研宄方向原分子流行病学指导教师崔尚金培养单位（研宂所）哈尔滨兽医研宄所硕（博)姓名.职称单位专业签名导师评硕导口柳巨雄教授吉林大学基础兽医学博导0阅硕导口西北民族大学生命科臧荣鑫副教授预防兽医学人博导0学与工程学院答辩主席i硕导口教授黑龙江八一农垦大学临床兽医学博导0硕导口师东方教授东北农业大学预防兽医学博导0硕导口金艾顺教授哈尔滨医科大学免疫学受博导0答硕导口赵凯教授黑龙江大学微生物学博导0辩硕导口刘胜旺研宂员哈尔滨兽医研宄所预防兽医学博导0委硕导口刘平黄研究员哈尔滨兽医研宄所预防兽医学口博导0贝硕导0高

4、玉龙研究员哈尔滨兽医研究所预防兽医学博导口硕导口博导口会议记录（秘书）郭龙军论文答辩时间地点2015年5月22日于哈尔滨兽医研宄所主楼317学术报告厅密级:论文编号:中国农业科学院学位论文猪转铁蛋白受体与PPV-VP2相互作用的初步研究PreliminarystudyoninteractionbetweenPorcineTransferrinReceptorandPPV-VP2硕士研究生：王晓玲指导教师：崔尚金研究员申请学位类别：兽医硕士专业领域名称：兽医培养单位：哈尔滨兽医研究所研究生院2015年5月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSc

5、iencesDissertationPreliminarystudyoninteractionbetweenPorcineTransferrinReceptorandPPV-VP2M.S.Candidate：WangXiaolingSupervisor：Prof.CuiShang-jinDegree：MasterofVeterinaryMedicineSpecialty:VeterinaryMedicineChineseAcademyofAgriculturalSciencesMay2015本课题由国家自然科学基金项目资助项目名称：猪细小病毒衣壳残基与转铁蛋白受体结合位点的研究项目编

6、号：31172349摘要转铁蛋白受体（TfR）是位于细胞膜上的Ⅱ型跨膜糖蛋白，能够介导含铁的转铁蛋白从胞外转移至胞内。猪细小病毒（PPV）的基因组由长度约为5000nt的单股负链DNA构成，可编码三种结构蛋白（VP1，VP2及VP2）及三种非结构蛋白（NS1，NS2及NS3）。VP2占据病毒衣壳的绝大部分，约80%，并且能够自我组装成类病毒粒子。病毒的感染和复制起始于其与细胞表面受体的结合，这也是影响病毒宿主特异性、致病性及组织嗜性的关键因素之一。已有研究证实，与PPV同属的犬细小病毒（CPV）和猫瘟热病毒（FPV）的细胞表面受体是TfR，通过病毒的VP2蛋白与其结合，进而感染细胞。

7、尽管PPV与CPV衣壳蛋白氨基酸的组成不尽相同，但其同源性较高，可达50~60%。基于此同源性可推测PPV也能够通过VP2与细胞表面的TfR结合，进而感染细胞。然而，很少有明确的证据表明，TfR是PPV的细胞表面受体，甚至有些证据表明，TfR不是PPV的细胞表面受体。为了明确TfR是否为PPV的受体，本实验进行前期的准备以及一些初步检测，主要包括定量PCR检测方法的建立、蛋白的表达及相互作用的初步鉴定、稳定表达猪TfR的HEK293细胞系的建立等。本研究针