猪脑心肌炎病毒nj08株感染性cdna克隆构建及拯救病毒生物学特性

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1、分类号？衍—讲巧＿＠学号２０１２１０７０４７爲请泉毒义每硕壬学位论文？猪脑心肌炎病毒ＮＪ０８株感染性ｃＤＮＡ克隆、构建及捶救病毒生物学特性方详县＇■ｈ■．Ｔ，■Ｖｆ．■■＇疗‘ｖｖＶ＇；占＞ｆ＊－．－？？一》＂＇一－．＾＾－－■．＇二一．：一、：王ｉ一＇．”。＜，＞Ｖ二＼■‘？，壬‘，：，一占？，－、＜．－＼亡＼：Ｃ．．Ｊ．－文—ｆ．分１－，Ｖ：■■１？．－＇：ｉ

2、Ｖ＿斗皆？＼；指輔胃姜平教授Ｖ察：養＾一？’万－，：Ｉ！；Ｓ，；，专业名称预防兽医学＾－Ｖ小＇立疋＇主．心苗户尸研究方向动物传染病防制、＼，＾答辩日期二〇—五年五月一：Ｔ巧－‘－‘：一＇－．．一－．．．＊■■■艾请．？■．－．一ＣＯＮＳＴＲＵＣＴＩＯＮＯＦＡＮＩＮＦＥＣＴＩＯＵＳＣＤＮＡＣＬＯＮＥＯＴＥＮＣＥＰＨＡＬＯＭＹＯＣＡＲＤＩＴＩＳＶＩＲＵＳＮＪＯＳＳＴＲＡＩＮＦＲＯＭＰＩＧＳＡＮＤＢＩ

3、ＯＬＯＧＩＣＡＬＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＯＦＴＨＥＲＥＳＣＵＥＤＶＩＲＵＳＢｙＦａｎＰｕｘｉａｎｇＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆｔｈｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ化ｒｔｈｅＭａｓｔ；ｅｒＤｅｇｒｅｅｏｆ乂ｇｒｏｎｏｍｙＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＡｒｉｌ２０１５ｐｐ，ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａｙ，２０１５原创性声明本人謝重声明：所呈交的

4、学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者ｗｊ／（需亲笔）签名：年月／日学位论文版权使用授权书、使用学位论文的规定本学位论文作者完全了解学校有关保留，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版允许论文被查飼和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入

5、有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密／＂＂（请在｜＾；１上方框内打＞／）学位论文作者（需亲笔）签名禱读年／月／曰导师（需亲笔）签名：年／月１日目录目录病要１ＡＢＳＴＲＡＣＴＩＩＩ上篇文献综述一第章脑也肌炎病毒的研究进展１１病毒分类１２ａ化特＆２３分子生物学特性３４流行病学６５致龍制８６临床症状及病理变化１０７诊断１１８防＾￥１３９

6、也病毒反向遗传学研究进展１４９．１也病毒反向遗传学操作技术原理及影响因素１４９．２反向遗传学操作技术在也病毒研究中的应用１５参考文献１８下篇研究内容第二章猪巧也肌炎病毒感染性克隆的构建及鉴定２９１材料３０Ｕ病毒与细胞３０１．２主要试剂３０１．３实验动物３０１猪脑也肌炎病毒ＮＪ０８株感染性ｃＤＮＡ克隆构建及择救病毒生物学特性２方法３０２．１引物设计与合成３０２．２病毒总ＲＮＡ的提取３１－２３ＲＴＰＣＲ扩増目的基因片段３２２．４ＰＣＲ产物回

7、收与纯化３４２．４ＥＭＣＶ中间载体的构建３４２．５病毒全长ｃＤＮＡ克隆的构建％２．５全长ｃＤＮＡ克隆的转染及病毒逐救３７２．６姪救病毒滴度测定３８２．７姪救病毒遗传标巧的鉴定３８２．８间接免疫巧光试验３８２．９病毒生长曲线３９．－．２１０病毒蚀斑试验．．．．．３９２．１１小鼠致病性试验３９３结ｍ４２３．１ＥＭＣＶ基因组片段的扩増４２３．２全长ｃＤＮＡ质粒的构建４３３．３姪救病毒滴度测定４４３．４姪救病毒基因遗传标记的鉴定４４３．５间接

8、免疫巧光试验（ＩＦＡ）４５３．６病毒多步生长曲线４５３．７蚀斑试验４６３．８小鼠致病性试验４６４職４８参考文献５０第請重组巧也肌炎病毒灭巧疫苗小鼠免疫特性５５１＃料５