猪等孢球虫的分离鉴定及其防治药物的效力试验

猪等孢球虫的分离鉴定及其防治药物的效力试验

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1、、'、-*、^:--./三轉t;*%;^^、一諸 ̄?’-—?、'。片^;-TT.^:..、严攀.、可 ̄气1成f^,了分类号学号厕5一巧_^.^‘..UDC、.声、.密级.少賺争叫义葦麵.、^今^,S吉,今;c巧.-少品户U参学住冷文三..>V声;>.一-乃'/(学术型)各芝:手净猪等袍球虫的分离鉴定及其防治药物的效力试骑^々:t.戶^^齡r臧传候Vr《作片指导教师姓名:陶建平教授,扬州大学,江苏扬州,225009'V申请学位级别:硕壬学科专

2、业名称:动物性食品安全论文提交日期:2015年4月论文答辩日期:2015年6月.、一、'学位授予单位.:扬州大学学位授予日期:.''*^..答辩委员会主席.:、一:^巧^'.?#?'一安、’身-'.>,^?二备巧%^>次V.确.、:遊->^;繁來-沪、娘繁篇^若雜 ̄二f今r;.方^勢片文知交义、一‘、-、、'-1.始,‘:齡激論:六克臧传伎=猪等抱球虫的分离鉴定及其防治药物的效力试验^猪等抱球虫的分寓鉴定及其防治药物的效力试验中文摘要’/’)(猪球虫病是

3、由猪等抱球虫(s〇5porasws和某些艾美耳属巧werm)球虫寄生于仔一レ猪小肠上皮细胞内引起的种ッ腹泻为主要特征的寄生性原虫病,呈世界性分布。在欧美?国家,猪等抱球虫是引起714日龄仔猎腹泻的主要病原。猪等抱球虫病的临床症状与其,在诊治上易产生误诊,他病原引起的仔猪腹泻很相似。由于球虫具有严格的宿主特异性因此对猪球虫病的研究只能W猪作为模型动物,。然而用猪作为模型动物的试验研巧管理难度较大,同时猪球虫的繁殖率又较低W及哺乳动物球虫的人工感染试验研究的不确定性,所对猪球虫病的研究相对较少,,。目前猪等抱球虫

4、病的防治多选用横胺类药物但其治疗效果不确定;在传统分类上,猪等抱球虫隶属艾美耳科(Eimeriidae)、等抱球虫属(/5(巧wra),但随着对其他哺乳动物等抱球虫的生活史研究,认为哺乳动物的等抱球虫为成囊类球虫,与鸟类的等抱球虫不同。为此,本文就猪等抱球虫的生物学特性及其种系发育关系进行了研巧与分析,并通过人工感染试验评价了妥曲珠利对猪等抱球虫病的效力,为猪等抱球虫病的防治提供理论与实验依据,也为猪等抱球虫的分类位置提供依据。1猪等抱球虫纯种株的分离鉴定及其生物学特性的研究为了了解猪等抱球虫的生物学特性和

5、排卵囊规律,对纯种卵囊进行分离与鉴定后,分24别用4X1〇个和1X1〇个猪等抱球虫抱子化卵囊感染24日龄无球虫感染的仔猪,感染后观察猪的临床症状及球虫的潜隐期、显露期和排卵囊量。结果盘示,仔猪感染4X1护个卵4X囊后未出现明显的临床症状,感染I1〇个卵囊后第6天出现明显的临床症状,主要表现2为精神沉郁,,24X1〇,食欲不振皮肤灰白排灰色的稀冀。感染后第1d症状好转。仔猪感染4个与IX10个卵囊的排卵囊规律基本相似,潜隐期均为5d,显露期分别为7d和18d,2??排卵囊高峰期分别是在感染后第

6、710d和第712d。感染4X10个抱子化卵囊时每头6427X1,1X1猪的排卵囊总数为1.0个感染0个抱子化卵囊时每头猪的排卵囊总数分别为666.47X1〇、6.37X1〇个。结果表明本文建立的猪等拖球虫虫株(命名为猪等抱球虫扬州株)。对仔猪有致病性,可用于猪球虫病的研究2猪等抱球虫扬州株18SrRNA基因的克隆与系统发育分析为了从分子水平上证实本文建立的等抱球虫虫株确实是猪等抱球虫,并探讨猪等抱球,首先通过PC民扩增,虫扬州株与其他球虫间的亲缘关系、DNA片段的克隆及测序获得猪等抱球虫扬州株

7、的18SrRNA序列;然后比较该序列与GenBank中猪等袍球虫及相近种n扬州大学硕±学位论文属原虫18SrRNA基因间的同源性,并构建系统发育进化树。结果显示,猪等抱球虫扬州一%8SrRNA序列与另株猪等抱球虫的同源性为99.8株的1,与其他哺乳动物等抱属球虫上一的同源性也都在98%W;猪等抱球虫与弓形虫属、新袍子虫属等成囊类原虫构成个姊妹群一,两者构成个分支后又同住肉抱子虫属原虫形成姊妹群;而艾美耳属球虫与鸟类等一抱属球虫间的亲缘关系较近,两者形成个分支后与前者间形成姊妹群。3猪等抱巧虫扬州株I

8、TS区序列的克隆与系统发育分析一打S区序列进行PCR为了进步探讨猪等抱球虫的分类位置,对猪等拖球虫扬州株的扩增、克隆并测序,将得到的ITS序列与GenBank中猪等抱球虫及相近种属原虫ITS区基因序列进行同源

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