水貂肺炎病原菌的检测及绿脓杆菌多价灭活疫苗的制备与免疫研究

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3、‘Ａ＇＇户－，：：，ｖ，．答辩委员会主席；．杳＜扣ｖ论文评阅人：：義苦．．＾蹲巧Ｖ把巧平Ｉｌｆ薦議讓曜－、－Ｎ—＞－Ｖ＼＼？Ｖ＼、＼：＇．－－＇’：一一一＇ｔ＇二．荀＇．Ｖ■■．：：■。‘：＇一心话Ｖ：／ｆＶ別ｒ？’．一＇、‘片，的Ｊ＼＇户一？？．．Ｉ＇＊？，１－？‘＇－一？．一．，．．．１一＿－．一，．．学校代码：１０２２５学号：Ｓ１５５１９学佐冷文水貂肺炎病原菌的检测及绿賊杆菌多价灭活

4、疫苗的制备与免疫研究孟洋指导教师姓名；张彥巧副教授东北林业大学申请学位级别；硕±学科专业；生理学论文提交日期：２０１５年４月论文答辩日期：２０１５年６月授予学位单位；东北林业大学授予学位日期：２０１５年６月答辩委员会主席；论文评阔人；ＵｎｉｖｅｒｓｉｔＣｏｄｅ；１０２２５ｙＲｅｉｓｔｅｒＣｏｄｅ：Ｓ１５５１９ｇＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｎｅｕｍｏｎｉａＰａｔ

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6、ｔｙ：ＮｏｒｔｉｉｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ搁巧摘要水貂细菌性肺炎是困扰水貂养殖业的难题，为了调查引起该病的主要病原苗并探索安全有效的防治方法，２０１１年至２０１３年，对从山东、迂宁两省送检的水貂肺炎病例进行病原菌分离，共分离到３８株细菌，结合生化鉴定和分子生物学鉴定方法，最终确定包括３１株绿朦杆菌，４株肺炎克雷伯氏菌，１株臭鼻克雷伯氏菌，１株产酸克雷伯氏菌和１株与绿朦杆茵混合感染的鲍曼不动杆菌。绿朦杆菌包括Ｈ个血清型Ｇ型（２２／３１）、Ｃ型（６／３１）、Ｂ型（３／３１），Ｇ型为

7、主要流行血清型。药敏试验结果显示所分离到的３８株肺炎病原菌均对亚胺培南和美洛培南敏感，对氨节青霉素和阿莫西林／克拉维酸耐药。所有分离到的病原茵均对小鼠有较强致病性。一取绿賊杆菌Ｇ、Ｃ、Ｂ血清型各株，做标准抗原，并免疫家兔，采集血清做标准抗体，通过方阵凝集试验确定标准抗原抗体最适反应浓度。将分离到的绿賊杆苗菌株免－Ｌ疫小鼠，采集血清，利用标准抗原检测免疫后小鼠血清效价，最终筛选了ＰＡ１４（Ｇ－型－（、）、ＰＡＬ０５Ｂ型）ＰＡＬ０６（Ｃ型）Ｈ株免疫原性较好的菌株作为疫苗候选茵株。Ｗ’９终浓度为０．３％甲

8、酵，经３７Ｃ、２４ｈ对菌液进行灭活处理。疫苗包含９ｘｌ〇ＣＦＵ／ｍＬ的Ｇ９型和Ｂ型绿賊杆菌，６ｘｌ〇ＣＦＵ／ｍＬ的Ｃ型绿販斤茜，配Ｗ２０％铅胶佐剂，０．０１％的硫柳隶，免疫健康无抗体的水紹进行抗体效价跟踪，结果