氧化鱼油、丙二醛对草鱼(ctenopharyngodon idellus）肝胰脏、肠道胆固醇、胆汁酸合成代谢的影响

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1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士学位论文题目氦化奋油、丙二醛对苜鱼（Ctenopharvnsodonidellu,imii,mmmm,研究生姓名黄雨薇指导教师姓名口十元土专业名称水产养殖研究方向水产动物营养与饲料2015年3月论文提交日期苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责

2、任。论文作者签名：寺泰益日期：义/K夺/(?.苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社)、中国学术期刊（光盘版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。..•J涉密论文口本学位论文属在年一月解密后适用本规定。非涉密论文口论文

3、作者签名：日期：^o/kMc导师签名：仏卞认日期：UkAh氧化鱼油、丙二醛对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏、肠道胆固醇、胆汁酸合成代谢的影响摘要摘要第一章草鱼(Ctenopharyngodonidellus)HMGCR基因的全长克隆、生物信息学分析及组织表达分析3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methylglutarylCoAreductase，HMGCR）是内源性胆固醇合成的关键限速酶，在维持胆固醇稳态方面具有重要作用。本实验利用cDNA末端快速扩增（RACE）法获得了草鱼HMGCR基因的cDNA全序列。HM

4、GCR全长3594bp，5’端非编码区（5’-UTR）长77bp，3’端非编码区（3’-UTR）长988bp，开放阅读框（ORF）为2529bp，编码842个氨基酸组成的多肽链，分子量91.48kD，理论等电点6.27。草鱼HMGCR蛋白包括两个结构域：62219氨基端复杂的复杂的跨膜区域（Asp-Leu）和羧基端细胞溶质催化区域419826220418（Asn-Arg）,这两个序列通过一个可变的亲水接头序列（Val-Ser）连接起827821来，存在一个磷酸化位点（Ser）和一个催化活性位点（His），前39个氨基酸139残基（Met-Ala）为信号肽。由氨基酸同源性分

5、析和进化分析可知，草鱼HMGCR与斑马鱼、丽脂鲤等鲤科鱼类的进化关系较近，与斑马鱼的同源性最高（89%）。通过组织表达分析表明，草鱼HMGCR在被检测的7个组织中都有表达，其中在肝胰脏中的表达量最高，其次为肌肉、肾脏和心脏。研究结果为进一步开展对草鱼HMGCR调控胆固醇代谢的分子机制研究提供了理论依据。第二章草鱼(Ctenopharyngodonidellus)CYP7A1基因的全长克隆、生物信息学分析及组织表达分析胆固醇7α羟化酶(cholesteral7αhydroxylase,CYP7A1)是胆汁酸经典合成途径的关键限速酶，在维持胆汁酸稳态方面具有重要作用。本实验利

6、用cDNA末端快速扩增（RACE）法获得了草鱼CYP7A1基因的cDNA全序列。CYP7A1全长1771bp，5’端非编码区（5’-UTR）长22bp，3’端非编码区（3’-UTR）长219bp，开放阅读III摘要氧化鱼油、丙二醛对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝胰脏、肠道胆固醇、胆汁酸合成代谢的影响框（ORF）为1530bp，编码509个氨基酸组成的多肽链。分子量57.74kD，理论522等电点6.54。草鱼CYP7A1蛋白包括两个结构域：包含跨膜螺旋(Leu-Leu)的氨基端和包含保守核心序列的羧基端，其中氨基端疏水性强，保守性弱，而羧基端1

7、24的半胱氨酸在这些物种中高度保守，前24个氨基酸（Met-Ser）为信号肽。由氨基酸同源性分析和进化分析可知，草鱼CYP7A1与斑马鱼、丽脂鲤等鲤科鱼类的进化关系较近，与斑马鱼的同源性最高（80%）。通过组织表达分析表明，草鱼CYP7A1在肝胰脏中的表达量最高，其次为肾脏，在其他组织的表达量很少。研究结果为进一步开展对草鱼CYP7A1调控胆固醇代谢的分子机制研究提供了理论依据。第三章氧化鱼油对草鱼(Ctenopharyngodonidellus)肝胰脏、肠道胆固醇、胆汁酸合成代谢相关酶基因表达的影响为了研究氧化鱼油对草鱼肝胰