氢氧化铝佐剂对灭活轮状病毒免疫原性的影响

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1、科学学位硕±学位论支单位代码：１０６７８分类号；Ｒ３７３．９学号：２０１２０３０密级：尾略Ｓ种常硕±学位论文馨氯氧化铅佐剂对灭淸轮状病毒免疫原性的影响院（系）所辰挙生物学研巧所研巧生娩名孙胳寒学科、专业年物化学与分子生物学学位类型科学学位指导教师孙巧盛巧巧员二〇—五年五月見跨ｉｌ种犬掌硕ｉ学位论文氨氧化铅佐剂对灭活轮状病毒免疫原性的影喃Ｔｈｅｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃｉｍｐａｃｔｏｆｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄｒｏｔａｖｉｒｕｓｃａｕ

2、ｓｅｄｂｙａｌｕｍｉｎｕｍｈｄｒｏｘｉｄｅｙ研巧生姓名孙晓寒＞学科、专业生物化学与０＾生物举学位类型科学学位指导教师孙巧盛研究员指导小组教师率鸿钓研究员完成日巧二〇—五年五月尾巧Ｓ种ｆ、常研巧生学俭论文研巧撰写声明本人郑重声明：本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位谏题研巧所取得的研究成果，不包含他人或其他。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研巧和论文做过贡献的同道我均在论文一中作了明确的说明并表明谢意。

3、该学位论文资料若有不实之处，本人愿承担切相关责任。论文作者（签名）：多？年＂月皮ｊ曰尾跨§种家研究生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可公布论文的全部或部分内容（确属保密内容己注明，并在解密）后遵守此规定；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。、学位论文作者（签名）；别指导教师（签名）：■年月曰，年月》曰＞０瓜主支ｊｆ

4、＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盘版）电子＂进行电子和网络出版，杂志社，并编入ＣＮＫＩ系列数据库传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章捏》规定享受巧关权益。学位论文作者（签名）指导教师（签名）：月＊曰乂年：Ｈ曰＞＜衣年女月义＾目录１摘要Ａｂｓｔｒａｃｔ３刖胃５一第部分１１ＺＴＲ－６８人轮状病毒株灭活疫苗的制备１１一１１、实验材料二实验方法１３Ｈ、结果与分析２０

5、四＾讨论２７五＞小结２９＾第二部３０５５轮状灭活病毒－（ＺＴＲ６８株）在小鼠中免疫应答研究３０一＞实验材料３０二实验方法３２Ｈ、实验结果及分析％邮讨论４０４３五、小结参考文献４４附录４８文献综述５１１攻读学位期间发表文章情况６ｍ６２昆明医科大学硕±研究生学位论文摘要【目的】研巧评价氨氧化铅佐剂与灭活轮状病毒疫苗的最适配比。预防传染病传统有效的疫苗主要有减毒活疫苗和灭活疫苗。轮状病毒疫苗自９０上世紀年代

6、初开始研制，现有Ｈ种减毒活疫苗用于预防轮状病毒感染，Ｒｏｔａｒｉｘ、ＲｏｔａＴｅｑ和罗特威。减毒活疫苗在诱导全面免疫反应有其优势，但也存在一些如毒力返祖，不易除去外源因子污染，母体抗体对疫苗有效性影响，不能用于免疫缺陷儿童或进行免疫抑制治疗者接种等问题。灭巧疫苗可最大限度降低上述问题，灭活疫巧安全性优于活疫苗但有效性往往低于活疫苗。因此，添加佐剂是增强灭活疫苗免疫原性提高有效性的常用方法。氨氧化铅是常用且有效的人用疫苗佐剂。如何将氨氧化铅佐剂与疫苗进行最适配比是关系到了灭活疫苗的有效

7、性和安全性的主要问题，本论文就此问题做了系统的研究。【】－６８方法疫苗制备：将在Ｖｅｒｏ细胞上培养的轮状病毒ＺＴＲ株收获的原液，通过浓缩、纯化和灭活工艺获得灭活轮状病毒疫苗。动物免疫：选用ＩＣＲ小鼠，，雌雄各半。肌肉注射，免疫２次，间隔两周，免疫后１４ｄ采血，蚀斑减数中和试验检測小鼠血清中和抗体效价。氨氧化侣对疫苗免疫原性影响实验包括两部分：一〇Ｈ一第部分不同浓度ＡＫ＞对同疫苗浓度（１６０ＥＵ／１００山）的比较，实验动物０２ｍｍｌＡ１ＯＨ＋１６０ＥＵ］０００４ｍｍｌＡＯＨ＋１６０Ｅ

8、Ｕ１００山、０．８分别注射．ｇ／３／山、．ｇ／１３／（）（）ｒａｇ／ｍｌＡ１（０巧计１６０ＥＵ／１００山及１．６ｍｇ／ｍｌＡｌ（ＯＨ）汁１６０ＥＵ／１００ｕｌ；第二部分在同－ＯＨＡｌ（＞佐剂浓度（０．８ｍｇ／ｍｌ）与不同抗原浓度进行比较，实验动物分别注射２５ＥＵ、１０ＥＵ４０Ｅ３２０ＥＵ６４０ＥＵ免疫剂量为．、Ｕ、１６０ＥＵ、及疫苗抗原，同时设相应无佐剂