根瘤农杆菌介导的水稻转基因体系研究

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1、分类号５１＿§３＿？学号２０１１５２０１００３為音泉達义每硕±学位论文根瘤农巧菌介导的水稻转基因体系研究炼艳冷指导教师江玲教授专业学位农业推广硕壬研究领域作物研究方向植物基因工程答辩日期二０—五年五月ＳＴＵＤＹ－ＭＥＤＩＡＴＥＤＯＮＴＨＥＡＧＲＯＢＡＣＴＥＲＩＵＭＴＲＡＮＳＧＥＮＩＣＭＣＥＢＹＲＯＯＴＮＯＤＵＬＵＥＳＳＹＳＴＥＭＢｙＣｈｅｎＹａｎｌｉｎｇＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒ

2、ａｌｊｇｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ化ＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓＦｏｒＴｈｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｏｆＰｈｉｌｏｓｏｐｈｇｙＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏ化ｓｓｏｒＪｉａｎｇＬｉｎｇＣｏｌｌｅｅｏｆＡｒｉｅ山ｔｕｒｅｇｇＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＮａｎｉｎ２１００９５Ｃｈｉｎａｊｇ，Ｍａｙ，２（Ｕ５原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进

3、行研究工作所取得的成果，。除文中己经注明引用的内容外本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体。本人完全意识到本声，均己在文中明确方式标明明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名；遂＞王年ｔ月＾日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可（＾将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检

4、索＞１，可１＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密口。＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名；於／Ｊ：年＾月＾日导师（需亲笔）签名；年＾月＾曰目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴｍ符号与巧略语Ｖ一章文献錫也第１１植物转基因研究进展１２水稽转基因的研究进展２２．１水稻转化受体的研究进展３２．２水稍转基因方法的研究进展４２．３转基因在水稻育种上的应用８２．４水

5、稻转基因面临的主要问题及对策１１２．５生物安全性问题１２２．６水稻基因工程的发展趋势１４３本研究的目的及意义１５第二章根瘡农巧苗介导的水巧转基因体系研究１７１材料与方法１７１．１植物材料１７１．２茜种与受体材糾１７１．３常用培养基１７１４愈．伤组织诱导１８１．５农杆菌的培养１８１．６水稻愈伤组织与农杆菌的共培养１９１．７抗性愈伤组织的筛选巧１．８抗性愈伤组织的分化１９１．９转基因植株再生及移栽１９１．１０观察记载和统计方法２０２

6、结果与分析２０２．１成熟胚与未成熟巧愈伤诱导分析２０ｉ根瘤农杆菌介导的水稻转基因体系研究２２２．２不同品种成熟巧在不同培养基上诱导情况，２．３不同品种转化效率的差异２２２．４转基因体系应用效果分析２５３讨论２９第兰章全文结论３１１总．３１结２本研究的创新之处３１参考文献３３附录３９Ｓ谢４７ｍ要根瘤农杆菌介导的水稻转基因体系研究摘要水稻占我国粮食总量的约４０％，也是世界上最重要的粮食作软。由于水稻全基因组

7、测序已完成一，其已成为作物基因组研究的种典型的模式作物。水稻转基因广泛采用农杆菌介导法，此法优点在于高效率、低费用、周期短、拷贝数低和基因沉狄现象少等、转化率等与其品种间的遗传差异性存在密切联系，水稻转。然而水稻植株再生基因的研究重点逐步转向如何建立新型的愈伤组织再生体系和农杆茵转化体系。本研究从梗稻ａｏｎｉｃａ）品种宁巧１号、日、东梗等为材料Ｕｐ本晴，进行成熟胚和未成熟巧的愈伤组织诱导培养，通过根瘤农杆菌介导转化法，进行愈伤组织的转化，一从而构由农。结果表明建了套高效的杆茵介导的水稻转基因体系，与成

8、熟胚相比，未成熟胚的胚性愈伤组织诱导率相对较高，与；不同品种在愈伤诱导上存在差异宁梗１号和日本晴相比，东梗的成熟胚和未成熟化的愈伤组织诱导率分别高达９６．２％和〇９６％，胚性率也高达９５／〇；将不同目标基因转化上述王个品种成熟胜愈伤组织，调查抗性愈伤转化率和抗性植株转化率，