枣缩果病菌的初侵染时斯及防研究

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1、K^^f^fAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI硕士学位（毕业）论文枣缩果病菌的初侵染时期及防治研究学位申请人：赵乐指导教师：冉隆贤教授学科专业：森林保护学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月四日独创性声明木人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。月/f学位论文作者签名：^分、签

2、字F1期：20丨上年学位论文版权使用授权-卞本学位论文作者完全了解河北农业大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权河北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名；fet导师签名签字F1期：年么月签字日期：汐。/广年b月n学位论文作者毕业后去向电舌工作单位:邮扁通讯地址:分类号：S763.15单位代码：10086密级：公开学号：2012398枣缩果病菌的初侵染时期及防治研究Primaryin

3、fectionperiodofthepathogencausingfruitshrinkingdiseaseinZizyphusjujubaanditscontrol学位申请人：赵乐指导教师：冉隆贤教授学科专业：森林保护学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二〇一五年六月四日摘要本试验应用链格孢菌的特异性引物和BOX-PCR指纹图谱分析技术研究了从2008-2013年分离自河北、河南和山西省不同地区的16株链格孢菌；通过对链格孢菌rCN193进行硫酸铜抗药性标记得到稳定突变体CN193Cu并接种于林间，研究枣缩果病菌的侵染规律；筛选了抑制枣缩果病菌的生防菌株，并制成细菌制剂喷施于

4、林间，调查各生防菌的防治效果。主要结果如下：1枣缩果病菌不同菌株的特异性引物扩增及其BOX-PCR指纹图谱分析通过应用链格孢菌的特异性引物对AAF2/AAR3和Aalt-F/Aalt-R对分离自不同地方、不同时间的16株病原菌进行特异性片段的扩增，均获得341bp和450bp的DNA特异性片段，表明16株菌株均为链格孢属菌株Alternariaalternata。BOX-PCR指纹图谱结果显示，使用引物BOXAIR扩增供试的16株菌株，得到总条带16条。在相似系数为0.73时，供试的16个菌株被分为五个遗传相似组。聚类分析结果表明利用BOX-PCR技术可以区分不同地理分布的16株链格孢菌。2

5、枣缩果初侵染病菌Alternariaalternata抗硫酸铜标记研究本试验采用平板抑菌圈法筛选出硫酸铜可以作为标记枣缩果病菌A.alternataCN193菌株的药剂，并将培养基中硫酸铜的浓度由1.5mg/mL逐渐提高至4.5mg/mLr培养菌株对硫酸铜的抗性，得到了稳定的抗硫酸铜突变体CN193Cu。通过田间致病r性测定并结合BOX-PCR指纹图谱分析技术，检测了抗硫酸铜突变体CN193Cu菌株的稳定性及侵染时期。结果表明，硫酸铜抗性可以作为链格孢菌的稳定标记，枣树花r期接种能够发病，并再次在病果中分离到突变体菌株CN193Cup，说明病菌在花期即能侵入枣树。本研究首次利用硫酸铜标记枣缩

6、果病菌A.alternata，为研究枣缩果病菌在田间的侵染规律和有效控制该病打下了基础。3枣缩果病生防菌筛选及防治研究室内生防菌筛选试验采用抑菌圈法和菌丝生长抑制法对11个细菌菌株进行枣缩果病菌A.altrenata的抑制试验，筛选出Y2、Y4、CN181、G1、G4、G6、G87个菌株对枣缩果病菌A.altrenata的生长均有抑制作用，其中Y2、Y4、G1三个生防菌对链格孢菌孢子萌发的抑制作用最明显。将3种细菌制成细菌制剂，按比例稀释后喷洒到林间，设置异菌脲为化学药剂效果对照。林间防治试验结果表明：异菌脲的林间防治效果较稳定，防治效果达到80%以上；其次是Y4，防治效果达到60%以上，与

7、化学药剂异菌脲的田间防治效果没有显著差异。关键词：枣缩果病；链格孢菌；BOX-PCR；突变体；致病性；生物防治PrimaryinfectionperiodofthepathogencausingfruitshrinkingdiseaseinZizyphusjujubaanditscontrolSpeciality:ForestProtectionPostgraduate:ZhaoLeSupervisor:Pr