日粮碳水化合物油脂比对断奶仔猪肠道微生物区系的影响

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1、分类号：S816单位代码：10193密级：公开学号：2012596硕士学位论文日粮碳水化合物/油脂比对断奶仔猪肠道微生物区系的影响EffectsofDietCEV/FEVonIntestinalMicrofloraofWeanedPigs作者姓名：于文雅学位类别：农学硕士专业名称：动物营养与饲料科学研究方向：单胃动物营养指导教师：孙泽威副教授所在学院：动物科学技术学院2015年6月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业

2、大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大

3、学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月摘要碳水化合物、油脂是动物饲粮能源的重要组成部分，对动物的生理健康与生产性能具有重要影响。本研究探索了饲喂不同碳水化合物/油脂比日粮断奶仔猪肠道微生物区系的变化规律，为进一步优化仔猪日粮能源结构提供了一定的依据。试验I：本试验旨在研究碳水化合物/油脂比日粮对断奶仔猪肠道微生物及代谢产物的影响。试验设计如下：

4、选用健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪(N=18头)，随机分为3组，每组6个重复。饲喂日粮的碳水化合物与植物性脂肪的能值比（CarbohydrateEnergyValue/FatEnergyValue,CEV/FEV）分别为：11.7：1.0（低油脂组）、1.5：1.0（中油脂组）和1.0：6.9（高油脂组），试验日粮消化能均为14.6MJ/kg，蛋白质水平均为17%。采用比色法、气相色谱及传统微生物培养等技术，测定断奶仔猪肠道PH、挥发性脂肪酸浓度、NH3-N含量和双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌的数量。结果表明：随着CEV/FEV的降低，结肠内容物的PH值显著升高（P<0.05）；盲肠和结

5、肠内容物挥发性脂肪酸浓度显著降低（P<0.05），NH3-N含量显著升高（P<0.05）；同时，盲肠和结肠大肠杆菌数量显著增加（P<0.05），乳酸杆菌和双歧杆菌极显著降低（P<0.05）。可见，在一定程度上提高日粮CEV/FEV有利于肠道有益菌群的生长，抑制有害菌群的增殖，维持健康的肠道环境。试验二：日粮碳水化合物/油脂比对断奶仔猪肠道微生物多样性的影响。试验采用苯酚法提取断奶仔猪盲肠、结肠内容物微生物总DNA，采用DNA定量检测仪及凝胶电泳进行检测，结果显示：所提DNA片段大小约为23000bp，OD260/OD280在1.7-2.0之间，浓度适宜，DNA纯度较好。将所提DNA进行

6、PCR扩增，扩增产物经变性梯度凝胶电泳后再进行相似性分析及切胶回收测序。DGGE图谱结果显示，盲肠微生物经PCR-DGGE分离条代数多于结肠；低油脂组盲肠微生物菌群组内相似性高于83%；盲肠三组日粮组间相似性为68%。结肠微生物菌群组内相似性最高达77%，而组间相似程度较低，中油脂组与其它两组相似性仅为53%，说明各组间微生物结构差异较大。日粮CEV/FEV比值为11.7:1.0，断奶仔猪盲肠和结肠中优势菌群为Unculturedbacterium、瘤胃球菌属及粪球菌属，可见高CEV/FEV日粮对断奶仔猪肠道微生物多样性更有益。综上所述，日粮碳水化合物与油脂在日粮中供能能值比不同，会不

7、同程度的影响断奶仔猪肠道微生物菌群结构。CEV/FEV比值为11.7:1.0的日粮盲肠和结肠更利于有益菌群的增殖，且微生物多样性丰富。因此，提高日粮碳水化合物/油脂比，有利于改善断奶仔猪肠道微生态环境、维持肠道健康及微生物群落结构。以上研究结果对于进一步优化仔猪日粮能源结构，探索不同能源载体物质在仔猪体内的消化、吸收和利用机制具有重要指导意义。I关键词：碳水化合物，脂肪，断奶仔猪，肠道微生物，PCR-DGGEIIAbstractCarbohyd