影响奶牛健康养殖的乳腺炎葡萄球菌研究

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1、分类号：S811.6S855.1学校代码：10712UDC：636研究生学号：2011060156密级：公开2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文影响奶牛健康养殖的乳腺炎葡萄球菌研究学科专业：动物营养与饲料科学研究方向：分子营养研究生李陇平指导教师：赵辛教授完成时间：2015年4月中国陕西杨凌Classificationcode:S811.6S855.1Universitycode:10712UDC:636Postgraduatenumber:2011060156Confidentialitylevel

2、:OpenDissertationforDoctorDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015THESTUDYOFMASTITIS-INDUCINGSTAPHYLOCOCCALISOLATESFORMOLECULARTYPINGANDANTIBIOTICRESISTANCEPROFILINGMajor:AnimalnutritionandfeedscienceResearchfield:MolecularnutritionNameofPostgraduate:LiLongPingAd

3、viser:Prof.ZhaoXinDateofsubmission:2015/4/15YanglingShaanxiChina本研究由国家特聘专家“千人计划”科研启动经费和奶牛乳腺炎中microRNA的表达分析和靶标基因的功能研究（国家自然科学基金31372282）提供资助ThisstudywasfinanciallysupportedbyagrantfromtheChinaThousandTalentsProgramandtheNationalScienceFoundationofChina(313722

4、82)影响奶牛健康养殖的乳腺炎葡萄球菌研究摘要奶牛健康养殖和抗病营养是提高我国奶牛养殖水平、改善奶品质和增强市场竞争力的新型支撑技术。奶牛乳腺炎是危害奶牛养殖业的主要疾病，不仅造成经济损失，而且危害动物和人类健康。金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的主要病原菌，可长期定植于乳腺组织，感染率很高。抗生素在控制细菌感染方面发挥重要作用，但是，随着耐药菌株特别是多重耐药菌株的不断出现，抗生素耐药问题已经成为影响人类健康和奶牛养殖业健康发展的重要因素。因此，研究奶牛健康养殖和抗病营养，有必要研究引起乳腺炎的病原菌。本研究

5、对奶牛乳腺炎源121株金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus,S.aureus）和97株凝固酶阴性葡萄球菌（CoagulaseNegativeStaphylococci,CoNS）进行抗生素耐药谱和苯唑西林耐药研究。采用以DNA测序为基础的spa和多位点序列分型（multilocussequencetyping,MLST）技术对121株S.aureus进行分子分型研究。进而分析菌株对大环内酯类(Macrolides)、林可酰胺类(Lincosamides)、链阳菌素类(Streptogram

6、ins)抗生素(MLS)的耐药表型和基因型。最后，对121株S.aureus携带的整合子/基因盒进行分析和研究。结果如下：1．研究发现121株S.aureus中，有113株苯唑西林敏感（MSSA），1株mecA阳性且苯唑西林耐药（MRSA），7株mecA和mecC阴性但苯唑西林耐药（MRSA）。普遍产生耐药的抗生素有氨苄西林/青霉素（80.2%），卡拉霉素（68.6%），庆大霉素（67.8%）和四环素（43%）。其中，19株S.aureus对1类抗生素产生耐药，23株对2类抗生素耐药，27株对3类抗生素耐药，

7、31株对4类抗生素耐药，8株对5类抗生素耐药，66株表现多重耐药（对2类以上抗生素产生耐药）。有46株菌对青霉素/氨苄西林/卡那霉素/庆大霉素/四环素产生联合耐药。2.奶牛乳腺炎源97株CoNS共分为9种不同的葡萄球菌。其中，1株mecA阳性且苯唑西林耐药的表皮葡萄球菌（methicillin-resistantStaphylococcusepidermidis,MRSE）和1株mecA阳性但苯唑西林敏感的溶血葡萄球菌（oxacillin-susceptiblemecA-positiveStaphylococ

8、cushaemolyticus,OS-MRSH）。菌株普遍产生耐药的抗生素有氨苄西林/青霉素（93.8%），卡拉霉素（72.2%），庆大霉素（64.9%）和四环素（63.9%）。有11株CoNS对1类抗生素产生耐药，24株对2类抗生素耐药，30株对3类抗生素耐药，19株对4类抗生素耐药，8株对5类抗生素耐药，57株CoNS表现为多重耐药（对2类以上抗生素耐药）。有44株CoNS对青霉素/氨苄西林/卡