小麦条锈病新抗源l693抗性基因的est分子标记作图与共线性片段分析

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1、。－；；二分聲号Ｓ５１２．１学号Ｓ２０１２１１１４四川巧化大学硕古学位论文．；＇＊’小麦条诱病新抗源Ｌ６９３抗性基因的ＥＳＴ分子标记作图与共线性片段分析王等指导教师罗培窩巧授学科专业生物化学与分子生物学研究方向植物分子生物学２０１５年６月■．．—？．．．．．■．．．．－－．．．■．．．圓．圓ＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＰｈ．Ｍ．Ｄｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ

2、ＥＳＴＭｏｌｅｃｕｌａｒＭａｐｐｉｎｇｏｆｓｔｒｉｅｍｓｔｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｐｇｅｎｅｉｎＷｈｅａｔＬｉｎｅＬ６９３ａｎｄＣｏｌｌｉｎｅａｒｆｒａｇｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓＢＷａｎＬｉｎｙｇｇＤｉｒｅｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ－．ＰｅｉＧａｏＬｕｏＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｙｇｙｌａｎｔｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏ（ｐｇｙ）Ｃｈｅｎｇｄｕ，６１１１３０，ＳｉｃｈｕａｎＪｕｎｅ２０１５，

3、论文独彻性黄明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的。Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个成果尽我所知，除了文中特别加人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已。与我在论文中作了明确的说明并表示了谢意。Ｔ／／曰研究生签名：吏％兴〇年＾月关于论文使用授巧的声明、：本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权

4、保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阀，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表。、传播学位论文的全部或部分内容．吐＾论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＿＂＂（请在上□内划Ｖ）研究生签名：衣知Ｉ《年＾月｛乂日导师签名：於化年＾月分日四川农业大学硕壬学位论文摘要‘？ＰｍｃｃＺｍｗ別ｗｍｓ小麦条绣病是由条形柄镑菌（嘶Ｘ／ｐ．趴舱）引起的世界范围内广

5、一个人口大国一泛发生的小麦流行病害。中国是，小麦是最主要的口粮之，小麦条铸病对我国小麦产量影响尤其大。我国小麦条铸病流行体系更为复杂，条诱菌有越冬区和越夏区，很难从空间和时间上阻断，使得防控工作很难取得成效。诸多学者研究指出，选育抗病品种和发掘新的抗病资源是防治小麦条铸病最有效的途径，不断发现新的抗病基因Ｗ应对新突变的毒性小种。历次大的条铸病流行，迫切要求我们多样化主一栽品种，不能单推广某个系列小麦，只能不断丰富抗性基因资源，抗条诱病研究是没有止境的斗争，任重而道远。前

6、期的研究通过ＳＳ民分子标记，己经确认抗病新品系Ｌ６９３的抗条铸病基因ｙ化６Ｗ扔巧７２５在小麦１Ｂ染色体上），并筛选到多对ＳＳ民掠记，但标记不够多，需要（一步加密通过其他分子标记技术进。本研究是Ｗ抗病亲本Ｌ６９３与感病亲本Ｌ６６１杂交得到的Ｆ２后代和Ｆｍ家系为作图群体。首先查找文献中报道的小麦１Ｂ染色体上的ＥＳＴ分子标记，进斤多态性筛选，更多的ＥＳＴ标记设计需要从Ｇｒａｅｎｅ－ｉｎＧ网站下载化染色体上ＥＳＴ资源，设计ＥＳＴＳＴＳ＇＇标化用［＾多态性筛选。之后用连锁￡８１引物对应

7、的￡８１序列与短柄草、水稻、高梁基因姐进行比较基因组学分析，确定仿王做Ｊ基因所在范围在短柄草、水稻、商梁上的共线性片段。具体实验结果如下；１．Ｌ６９３和感病亲Ｌ６６１ＦＦ本ｉ代抗病，Ｆ抗病亲本杂交得到的ｉ代自交得到的２３Ｒ１Ｓ代出现抗感分离，卡方检验符合：的分离比；Ｆ２出现抗感分离，经：３家系各行也一１Ｒ：２Ｈ：１ＳＬ６９３卡方检验符合的分离比，由此足Ｗ证明的抗条诱性是受对显性基因控制。这个Ｌ６９３的抗性基因暂时命名为２．前期工作已经通过ＳＳＲ标记将化定位在１Ｂ染色体上，

8、本研究采用ＥＳＴ一ＤＮＡ的ＰＣＲ分子标记技术进步加密遗传图谱。经过Ｆ群体基因组扩增和聚丙稀２８对－醜胺凝胶电泳检测，共得到连锁的ＥＳＴＳＴＳ标记；ＣＤ７７、ＷＥ１７３、ＷＥ２０ＫＢＥ４４３３００、ＢＥ５１８４０３、ＢＥ４４４０９４、ＢＥ４０４００５和ＢＥ４０５６９２，在构建的遗传连锁图谱上的位置分别是；１．１％ｃＭ、０．１１８ｃｍ、１．０１１ｃＭ、０．７５８ｃｍ、０．８５３ｃｍ、０名３７ｃＭ、０．９４８ｃＭ和１．２８２ｃＭ。其中