四个小麦品种上白粉菌的侵染过程观察及基因差异表达分析

《四个小麦品种上白粉菌的侵染过程观察及基因差异表达分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、分巧号Ｓ４３２．！学号Ｓ２０１２巧的四川巧化大学硕：ｉｒ学位论文四个小菱品种上白粉菌的侵染过程观察及基因差异表达分析气＇；李伟东．Ｉ指导巧师化敏巧巧－’学科专业植物病理学研究方向分子生物学在植物病理学中的应用２０１５年６月ＳｉｃｈｕａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａｓｔｅｒＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ０１任６化１１１１３１ｄｉｓｐｌａｙｏｆＷｈｅａｔｐｏｗｄｅｒｙｍＵｄｅｗｏｎｆｏｕｒｗｈｅａｔｃｕｌｔｉｖａｒｓ－ｂｙｍｅａｎｓｏ

2、ｆｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎｏｌｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｐｐｙＢｙＬ－ｉＷｅｉＤｏｎｇＡｄｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＺｈａｎＭｉｎｇＭａｊｏｒ：ＰｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙＤｉｒｅｃｔｉｏ打：ＴｈｅＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｉｎＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｇｙＪｕｎｅ２０１５沦文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其

3、他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它一教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。。《研究生签名；ｙ任年月／之日关于论文使用授巧的声明、本人完全了解四川农业大学有关保留使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家，允许论文被查阅和借阅，可采用影印有关部口或机构送交论文的复印件和电子版、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。＂因本论

4、文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＂＂（请在ｉｌ上□内划Ｖ）－＇研究生签名。／月曰：麥使為＞少年导师签名：＞作年々／月／《曰四川农业大学硕±毕业论文摘要’’小麦白粉菌（说Ｍ／ｗｅ化ａｇｒａ／ｍｎｉｓｆ．ｓ．／ｎｆｔ切）引起的小麦白粉病是世界各个小麦主产区的ｐ主要病害之一，目前防治白粉病最为有效的措施是抗病育种，，。然而小麦白粉菌变异极快导致小麦品种抗性丧失加快，抗性品种使用年限大大缩短，严重威胁了小麦的产量和质量。因此，对小麦白粉菌变异机制的研究具有重要意义，。本研究采用ｍＲＮＡ差异显示

5、分析技术探索小麦白粉菌在不同小麦晶种上的基因表达差异，分离差异表达的基因片段，并进行生物信息学分析。１．从田间采集白粉苗，分离纯化后，转接到四个含有不同抗性基因的小麦品种川农２６、川育２０、西科２号、内麦１２上，并对小麦白粉菌的侵染过程进行了细胞学观察，显微观察白粉苗分生抱子侵染巧期的芽管长度变化及乳突的形成情况。结果表明，小麦白粉菌在抗、一感材料上分生抱子形成芽管的长度有明显差异，乳突形成时间基本致，而抗性材料上郭突形成百分率在２化后仍保持在较窩水平，与感病材料差异明显。２．接种后，分别从四个小麦品种上收集白粉菌分生拖

6、子，提取ＲＮＡ，反转录，对ＤＤＲＴ’—ＰＣＲ条件进行了优化结果表明：ＤＮＡＴａｑ聚合酶２．５Ｕ、退火湿度４０Ｃ、引物浓度ｌＯＯｕＭ最为适宜。Ｗ３个错定引物巧２６个随机引物组合，共７８对引物组合，反转录产物为模版－ＰＣＲ进行ＤＤＲＴ，ＰＣＲ产物经电泳检测后，共找出差异片段４４条。－－－－３，得到四个测序结果（Ｂ、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４，．将部分差异片段进行测序１）利用软件和在线分析工具进行生物信息学分析。Ｂ－２９ｂ１，序列长度１ｐ，来源于川育２０上收集的白粉菌ＣＹ２０，引物纪合Ｂ０３２７／Ｂ０３１０。该片段的推定蛋白与来自小

7、麦白紛菌菌株９６２２４的序列有６０％的相似性，编码产物为銷氮醇Ｃ４姪化酶。该推定蛋白共４３个氮基酸，分子质量为５．１３１ＫＤ，等电点为１１．５４３，不稳５８－４定性系数为．５４，属于不稳定蛋白，脂洛指数为５４．４２，总平均亲水性为１．３２。ａ－〇－折叠２３〇－ＰｒｅｄｉｃｔＰｒｏｔｅｉｎ预测该蛋白二级结构中螺旋１６．２８／〇目．２６／〇Ｐ转角６０．４７％。，，－该蛋白的最大疏水指数为１．３４４，最小疏水指数为３．３５６。－Ｂ２，序列长度６７４ｂｐ，来源于西科２号上收集的白粉菌ＸＫ２，引物組合Ｂ０３２８／Ｂ０３０２，将其

8、最长的开放阅读框２６４ｂｐ翻译为氨基酸序列，与来自小麦白粉菌菌株９６２２４的序列的相似性为６０％，其功能是编码核糖体线