住院患者粪便中耐碳青霉烯g-杆菌调查及耐药机制研究

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1、分类号级密ＵＤＣ编号讀讀似淨硕ｄｒ学位论文住院患者粪便中財巧青霉巧Ｇ－杆菌巧查及財药化制研究ＴｈｅＰｒｅｖａｌｅｎｃｅａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆ－ｅｎｅｍ－ｒｅｓｃａｒｂａｐｉｓ化ｎｅｅＧｒａｍｎｅｇａｔｉｖｅｂａｃｉｌｌｉｉｎＳｔｏｏｌＳｅｃｉｍｅｎｓｐｆｒｏｍａｔｉｅｎｔｓｐ陆文婷导师姓名巧勇宇专业名称临巧检验巧巧学培养类型专业型论文提交日期２０１５年５月２０日南方医科大学２０１２级硕±学位论文住院患者裝便中耐碳青霉煤Ｇ－杆菌调查及耐药机制研究

2、ＴｈｅＰｒｅｖａｌｅｎｃｅａｎｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｅｎｅｍ－ｒｅｓ－ｎｅｃａｒｂａｉｓｔａｎｃｅＧｒａｍｇａｔｉｖｅｂａｃｉｌｌｉｉｎＳｔｏｏｌｐＳｅｃｉｍｅｎｓｆｒｏｍａｔｉｅｎｔｓｐｐ１课题来源：广东省自然科学基金巧２（Ｕ２００００９１５３）广东省科技计划项目口０１３Ｂ０１０４０４０２１）学位申请人陆文婷导师姓名巧勇宇专业名称临床检验诊断学培养类型专业型培养层次硕壬所在学院第一惦床医学院答辩委员会主席吴晓蔓教授答辩委员会委员温旺荣教授刘新光教授白晓春教授

3、蔡贞副教授２０１５年５月２０日广州硕壬学位讫文住晓患者粪便中耐碳青霉煤Ｇ－杆菌调查及耐药机制研究硕±研究生：陆文婷指导教师：巧勇宇教授摘要研究背景－随着抗生素的广泛使用，碳青霉巧类抗生素已成为治疗临床Ｇ杆菌感染的一－最后道防线，耐碳青霉帰Ｇ杆菌的快速传播越来越引起全球关注。产碳青霉稀酶是这类细苗对碳青霉帰类抗生素耐药的主要原因，碳青霉稀酶是指所有能一－明显水解亚胺培南或美罗培南等碳青霉赌类抗生素的类内醜胺酶，包括ＰＡｍｂｌｅｒ分子分类中的Ａ、Ｂ、ＤＨ类酶。大多数碳青霉蹄酶基因位于质粒、整合子等可转移性基因元件上。，可通过质粒

4、或转座子在相同或不同茜种间传播耐碳青霉稀Ｇ－－内酣胺类抗生素耐药抒菌不仅对ｅ，同时多数也对哇诺丽、氨基糖巧等其他类抗生素耐药，从而表现出多耐药甚至泛耐药的特性。耐药基因转、插入序列共同区ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ移元件在传播耐药性中起了重要作用。整合子（’一ｓｅｕｅｎｃｅｃｏｍｍｏｎｒｅｉｏｎＩＳＣＲ）ｑｇ，是种广泛存在于细菌基因组中的可移动基因元件，通过捕获耐药基因盒而导致细菌耐药性迅速产生及扩散，复杂性整合子ＩＳＣＲＩ是１与类整合子的串联形克其结构的特殊性使复杂性整合子可Ｗ水平转移更多的耐药基因，且该结构常位于接合性质粒上利于耐药基因的水平传播，对临床抗感染治

5、疗造成严重威胁。人体肠道是各种耐药细苗和耐药基因的储存场所和感染来源，因此粪便可通过污染周围环境造成耐药菌的广泛传播，美国疾病预防控制中也推荐粪便标Ｇ－本检测来监测耐碳青霉帰杆菌的携带者。Ｉ摘要－本硏究调查了住院患者粪便中的耐碳青霉嫌Ｇ细菌携带率，对耐碳青霉稀Ｇ－细茵进行属种鉴定和药敏试验，并对其耐药机制进行研究，检测了常见的碳青霉稀酶基因，ＥＳＢＬ基因，及常见的耐药基因转移元件：整合子和ＩＳＣ民，并一ＳＣ民步对整合子和，进Ｉ携带的耐药基因盒进行检测和分析阐明耐碳青霉締Ｇ－细菌的耐药机制，为临床更好的防治提供信息。因产ＮＤＭ超级细菌之前已经做

6、了相关研究ＮＤＭＧ－，本研究主要针对余下的非产耐碳青霉矫细菌展开。研究方法１．标本收集收集南方医院２０１３年７月至１２月之间住院患者粪便标本５０００份。在含２ｍｇ／１美罗培南麦康凯平板上培养分离耐碳青霉烁的革兰阴性杆菌。并进行分纯，ＤＮＡ。、转种和保存用试剂盒提取细茜全基因組２ｉ．菌株属种鉴定及药敏试验利用ＢＤｈｏｅｎｘ１００全自动微生物鉴定仪器ｐ－对耐碳青霉娇的革兰阴性杆茵进行属种鉴定和ＭＩＣ药敏试验。并同时用ＫＢ纸片法法对亚胺培南和美罗培南的药敏结果加Ｗ确认。３．１６ＳｒＲＮＡ基因测序利用标准菌株和临床常见菌巧建立１６ＳｒＲＮＡ基因一序列

7、分析方法，对细菌进斤分子生物学鉴定方法对南方医院Ｈ年来。利用这的临床难鉴定细菌进行鉴定一，并进步扩展到血培养标本的应用检测。对粪便中分离的耐碳青霉締的革兰阴性杆菌扩增１６ＳｒＲＮＡ基因并测序，经过序列分析进行其属种的确认，并与ＢＤｐｈｏｅｎｉｘ１００的鉴定结果进行比较。４．常见碳青霉巧藤基因的检测ＰＣ民检测粪便中分离的耐碳青霉稀的革兰阴性杆菌的常见碳青霉稀酶基因ＫＰＣ、ＶＭ、ＩＭＰ、ＳＰＭ、ＧＥＳ