人参内生菌多样性及其可利用菌株的筛选

人参内生菌多样性及其可利用菌株的筛选

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1、分类号:R282.2单位代码:10193密级:公开学号:2012097人参内生菌多样性及其可利用菌株的筛选Researchonginsengendophyticfungidiversityanditsavailableendophytescreening作者姓名:赵智灵学位类别:农学硕士专业名称:药用植物研究方向:中药资源保护开发利用指导教师:田义新教授刘学周讲师所在学院:中药材学院2015年5月独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立进行研究所取得的成果。尽我所知,除文中特别加以标注和致谢

2、所列内容外,论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处,本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名:签字日期:年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定,即:研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有,并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学,学

3、校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人(同意/不同意,务必打印后填写)吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版(涉密学位论文解密后应遵守此协议)。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果,必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名:签字日期:年月日指导教师签名:签字日期:年月摘要人参为名贵中药,具有增强机体免疫功能,抗疲劳,抗缺氧和心肌保护等作用,主

4、要成分是人参皂苷。人参内生菌对人参植物生长、其次生代谢产物积累及药材品质等均具有较大的影响。不同环境、不同定殖部位,内生菌的多样性也有所不同。栽培条件下人参的根腐病、疫病、锈腐病等病害严重制约着人参产业的健康发展,因此开发人参内生菌资源对人参种植业(如开发生物农药和菌肥),提高人参品质和保护环境,参地土壤改良都有重大实践价值。目前对人参内生菌的报道多集中在内生菌分离和内生菌次生代谢产物研究上,人参内生菌这一重要资源未得到充分开发。本研究对吉林10个不同产区人参内生菌生物多样性进行了研究,分析了内生菌群落结构的多态性

5、,探索了人参内生菌对人参病原菌的拮抗作用,将为揭示吉林省人参内生菌资源状况,以及进一步研发人参病害的生物防治剂和促生生物菌剂有重要意义。本文研究内容为以下几个方面:(1)分别用不同浓度的次氯酸钠和升汞进行不同时间的表面消毒,确定了适宜的消毒方法,包括:人参根的表面消毒用0.10%升汞处理11min;人参茎的表面消毒用0.10%升汞处理7min;人参叶的表面消毒选用2%的次氯酸钠处理5min。(2)采用组织块法分离人参内生菌,分离得到人参内生菌共30个属56种,其中芽孢杆菌属和青霉菌为优势菌,分别占总菌数的21.43

6、%和10.71%。(3)以各菌株在各部位出现与否为指标,用IBMSPSSStatistics19以word法对数据进行系统聚类分析,发现各部位之间共有菌种不同。人参根中分离到内生菌最多,达到21属36种,其中只存在于根部的内生菌有13种;人参叶中内生菌多样性指数和均匀度指数均最高,分别为0.8992和0.4304;人参根中内生菌优势度指数最高,为0.9244。(4)对同产地不同年生人参内生菌多样性分析发现,15中年生人参内生菌优势菌群集中,内生菌群落均匀度指数最小,为0.1437;9年生人参中内生菌种类较少,优势度

7、高为0.9067;5年生人参中内生菌群落多样性指数最大,为0.5095,群落稳定,种群分布较均匀。(5)对同年生不同产地人参内生菌多样性分析发现,汪清产地人参内生菌多样性指数最高,为0.7345,群落稳定;珲春产地的人参内生菌均匀度指数最高,为0.3284,分布较均匀;集安优势度指数最高,为0.8878,说明集安产地的人参内生菌优势菌群集中,优势属突出。(6)对人参内生菌复合筛选后,得到四株拮抗效果较好的内生菌,其中内生细菌Bacillusmethylotrophicus对锈腐病菌的抑菌活性较其他处理最强,抑菌圈直

8、径为49mm;内生细菌Bacillusamyloliquefaciens对灰霉病和立枯病菌的抑菌活性较其他处理最强,抑菌圈直径分别为41mm和31mm;内生真菌Penicilliumdaleae对菌核病、疫病和根腐病菌的抑菌活性较其他处理好,抑菌圈直径分别为35mm、38mm和36mm;内生细菌Bacillusvallismortis对黑斑病菌的抑菌活性较其

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