亲和层析分离粘虫中肠bbmv中杠柳新苷e的结合蛋白

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1、分类号，」学校代码：10712UDC：632.95研究生学号：20i205u200密级：公开©荔灶衣林t教大学2价5届攻读碩士学位研究生学位(毕、HO论文亲和层析分离粘虫中肠BB?vIV中杠拂新苷E的结合蛋白学科专业农药学研究方向农药毒理学研究生何振宇_____指导教师胡兆农教授完成时间20K年5月研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文

2、中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。时间：2^3"年月+曰导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生^所呈交的硕士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的4究W■，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我

3、愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。/导师签名:关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署•名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并

4、承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）〜、研究生签名：时间：年t月v曰Classificationcode:Q513Universitycode:10712UDC:632.95Postgraduatenumber:2012050200Confidentialitylevel:Publicit

5、yThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015SEPARATETHEBINDINGPROTEINOFPERIPLOCOSIDEEONMIDGUTBRUSHBODERMEMBRANEVESICLEOFMYTHIMNASEPARATABYAFFINITYCHROMATOGRAPHYMajor:PesticideScienceResearchfield:PesticideToxicologyNameofPostgraduate:HeZhen-yuAdviser:Prof.HuZhao-nongDateofsubmission:M

6、ay，2015YanglingShaanxiChina资助项目国家自然科学基金项目“基于化学蛋白组学策略分离和鉴定杠柳毒素作用于昆虫中肠细胞的靶蛋白”（31171868）PROJECTSFOUNDINGTheNationalNaturalScienceFoudProjects“IsolationandIdentificationthetargetproteinsofPeriplocatoxinininsectgutcellsstrategybasedonchemicalproteomics”（31171868）亲和层析分离粘虫中肠BBMV中的杠柳新苷E的结合蛋白摘要本研究以杠柳新

7、苷E为亲和配体，应用亲和层析技术研究了其在粘虫幼虫中肠刷状缘膜囊泡（BBMV）上的结合蛋白，旨在为进一步研究杠柳新苷类杀虫化合物在粘虫中肠BBMV上的作用靶蛋白研究奠定基础。主要研究结果如下：1.选用杠柳新苷E作为配基制作了杠柳新苷E亲和层析柱。以杠柳新苷E为起始反应物，与琥珀酸酐反应生成杠柳新苷E的衍生物，通过HPLC、MS和NMR对衍生物的结构进行了鉴定，结果表明成功合成了杠柳新苷E-半琥珀酸酯；采用碳二亚胺法将杠柳新苷E-半琥珀酸酯与EAH-Sephorase4B进行偶联，