n-甲基靛红酸酐标记杠柳新苷p分离粘虫中肠结合蛋白的研究

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1、分类号：0513学校代码••10712UDC:632.95-研究生学号：2012050202密级：公开蓊灶农林奇祆大学2015届攻读硕士学位研究生学位(毕业）论文N-甲基靛红酸酐标记杠柳新苷P分离粘虫中肠结合蛋白的研究学科专业农药学研究方向农药毒理学研究生________指导教师胡兆农教授完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生

2、学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，了切后果与法律责任均由本人承担.尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年/月#日导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生.所呈交的硕士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果

3、，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本，位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。

4、本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著.作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。^任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保

5、存、汇编论文）研究生签名时间><年/月分曰导师签名：时间X年“+曰Classificationcode:Q513Universitycode:10712UDC:632.95Postgraduatenumber:2012050202Confidentialitylevel:Publicity_ThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015STUDYONTHESEPARATIONOFMYTHIMNASEPARATAMIDGUTBINDINGPROTEINWITHTHE

6、METHODOFDIMETHYLANTHRANILATLABELINGPERIPLOCOSIDEPMajor:PesticideScienceResearchfield:PesticideToxicologyNameofPostgraduate:QiMengAdviser:Prof.HuZhao-nongDateofsubmission:May,2015YanglingShaanxiChina资助项目国家自然科学基金项目“基于化学蛋白组学策略分离和鉴定杠柳毒素作用于昆虫中肠细胞的靶蛋白”（31171868）Thegra

7、ntsweresupportedby“TheNationalNaturalScienceFoudProjects”(31171868,)N-甲基靛红酸酐标记杠柳新苷P分离粘虫中肠结合蛋白的研究摘要近年来西北农林科技大学农药研究所对杀虫植物杠柳（PeriplocasepiumBunge）的活性成分及其杀虫作用进行了比较系统的研究。为了进一步的研究杠柳杀虫活性成分杠柳新苷P的杀虫机理,本文对杠柳新苷P进行修饰标记后通过药物与中肠蛋白离体孵育以及活体饲喂两种不同处理方法，对杠柳新苷P作用于东方粘虫幼虫中肠组织上的结合蛋白进行

8、了初步研究。结果如下：（1）进行了N-甲基靛红酸酐对杠柳新苷P的标记修饰，得到标记产物杠柳新苷P-MIA，其对三龄粘虫幼虫的中毒症状与杠柳新苷P相同，载毒5µg的0.5cm×0.5cm小麦叶片饲喂后48h死亡率为12.5%，低于相同剂量下杠柳新苷P的活性。（2）将P-MIA活体饲喂粘虫六龄幼虫提取的中肠粗蛋白和P-MIA与粘虫六龄