云岭北段宿主动物嗜吞噬细胞无形体感染状况的调查研究

《云岭北段宿主动物嗜吞噬细胞无形体感染状况的调查研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中国图书资料分类号：学校代码：10679密级-学号：Y2012105062015届硕士学位论文云岭北段宿主动物嗜吞噬细胞无形体感染状况的调查研究InvestigationontheanimalhostsinfectedwithAnaplasmaphagocytophilumintheNorthernofYunLing学院（所）.•公共卫生学院专业：流行病与卫生统计学研究方向：鼠疫流行病学和群落生态学年级：2012级研究生：张文娟指导教师：高子厚副教授2015年6月5日声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导卜进行的研究丨：作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以

2、标注和致谢的地方外，论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大理学院或其他教育机构的位或证明而使过的材料。对本文的研究做山贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明，并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。研究生签名：^k日期：2o/i.论文使用和授权说明本人完全了解人理学院有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文S印件和论文电子版；允许论文被汽阅或借阅：学校可以公布论文的全部成部分内容，可以釆用影印、缩印或其他复制手段保存论文；授权学校将学位论文的全部或部分内荇编入有关数据痄进行检尜。

3、(保密的论文在解密后应遵循此规定）目录中文摘要…………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………3前言………………………………………………………………6材料与研究方法…………………………………………………9结果………………………………………………………………12讨论………………………………………………………………23结论………………………………………………………………25参考文献…………………………………………………………26研究生期间发表文章……………………………………………28云岭北段宿主动物嗜吞噬细胞无形体感染状况的

4、调查研究研究生张文娟导师高子厚副教授指导老师杜春红副教授摘要【目的】以滇西云岭北段为调查和研究的空间范围，小型兽类、家畜动物（牛、羊）和犬为研究对象,采用巢式PCR进行嗜吞噬细胞无形体16SrRNA基因扩增及测序分析，了解滇西云岭北段小型兽类、家畜动物（牛、羊）和犬感染噬吞噬细胞无形体的状况，为合理制定防控措施提供依据。【方法】1.样本采集以滇西云岭北段为调查和研究的空间范围，共采集样本1096份。其中小型兽类602份（采自德钦、维西、香格里拉县境内的白茫雪山东坡141份、西坡71份、阿东村52份、霞若乡66份、羊拉乡95份、翁水村31份、东旺乡24份、格咱乡11份、尼

5、西乡4份、中甸乡3份、建塘镇2份、三坝乡15份、滇金丝猴保护区52份、糯阁村20份和攀犬阁村15份）；犬315份（采自德钦县云岭乡73份、佛山乡73份、升平镇13份、燕门镇58份、羊拉乡28份、霞若乡70份）。家畜动物179份（采自德钦县45份牛血，香格里拉县110份牛血、24份羊血）2.DNA提取操作步骤按QIAFEN血液、组织DNA提取试剂盒进行。3.PCR扩增采用巢式PCR方法扩增无形体属16SrRNA片段。4.电泳PCR扩增产物采用1.5%琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像仪观察结果。5.序列测定和分析将PCR阳性产物进行测序，测序结果作Blast同源性比较，最后运用ME

6、GA6.0软件与GenBank收录的其它无形体属种株进行系统发生分析。【结果】1.共检测小型兽类4目7科16属29种共602只，从5属6种小型兽类中检出阳性标本10份，总阳性率为1.66％。2．检出的小型兽类阳性标本与加拿大（HG916766.1）、俄罗斯、西伯利亚（HM366583.1）1检出的AP在同一分支，同源性达99%。与俄罗斯（HQ629925.1）、斯洛文尼亚（AF481855.1）、中国湖北（HQ872463.1）、吉林(DQ449948.1)、德国（AY706390.1）、法国（EU857671.1）、西班牙（AY829457.1）不同宿主动物如刺猬、蜱

7、、羊等感染无形体株聚在同一大分支，但相距较远。3.315份犬血中扩增到目的片段共18份,总阳性率为5.71%(18/315)，其中中华田园犬的阳性率为7.14%(12/168)，藏犬的的阳性率为5.13%(4/78)，哈巴犬的阳性率为2.99%(2/67)，狼犬中未检出AP。4.所检出的当地犬感染的嗜吞噬细胞无形体16SrRNA基因与GenBank中收录的无形体属16SrRNA基因序列的同源性高达99～100%。进化树分析结果显示当地无形体分为2类流行株，将其命名为YunnanHGA1和YunnanHGA2，分别占检出菌株的16.67%和