乙型脑炎重组痘苗病毒疫苗安全性评价研究

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1、乙型脑炎重组痘苗病毒疫苗安全性评价研究StudyofSafetyEvaluationofVaccineofRecombinantVacciniaViruswithJapaneseEncephalitisVirus作者姓名：肖朋朋领域（方向）：预防兽医指导教师：金宁一研究员类别：兽医硕士答辩日期：2015年6月3日中文摘要乙型脑炎重组痘苗病毒疫苗安全性评价研究近年来，乙型脑炎病毒（JEV）在我国甚至亚洲地区广泛流行，威胁着人和家畜的安全，经过这些年我国政府及相关部门的努力，患乙型脑炎的人的发病率及死亡率不断下降，但是对于猪的乙型脑炎的

2、预防还没有猪专用的乙型脑炎病毒疫苗，目前一般采用弱毒疫苗SA14-14-2对猪进行免疫。因此，根据当前我国养猪行业的形势，需要一种猪专用的乙型脑炎病毒疫苗，本实验室研制的含乙型脑炎E抗原基因重组痘苗病毒疫苗rVTT-JEVE具有良好的免疫效果，但是目前尚不能证明该疫苗的安全性。本研究对本实验室研制的重组痘苗病毒疫苗rVTT-JEVE的安全性进行评价，首先对重组痘苗病毒rVTT-JEVE的理化特性进行研究，通过将其进行温度、酸碱度、乙醚、胰蛋白酶、氯仿、超声波及紫外线等理化因子的适当的不同变量的处理，检测其经处理后的病毒滴度的变化，证

3、明其对高温敏感，对酸碱有一定的耐受性，对氯仿、胰蛋白酶、超声波、紫外线均有一定程度的敏感性，完成了理化特性的研究。首先应用小鼠进行了免疫相关研究，且对重组痘苗病毒疫苗株rVTT-JEVE的安全性进行了初步评价，免疫小鼠后产生的特异性抗体水平显著高于弱毒疫苗组和对照组（P<0.05），经RT-qPCR方法检测重组痘苗病毒在小鼠体内残留发现，重组痘苗病毒在小鼠体内5-7d后拷贝数明显减少，通过分析其体液免疫及病毒残留，证明该候选疫苗具有良好的体液免疫且病毒在小鼠体内残留仅5-7d。通过猪体免疫，分析其免疫特性、病毒残留和环境释放，证实了

4、该重组痘苗病毒候选疫苗株rVTT-JEVE有良好的免疫特性，重组痘苗病毒在猪体内残留仅3d且不会向环境中释放，表明该候选疫苗具有良好安全性。关键词：重组痘苗病毒；乙型脑炎病毒；痘苗病毒；安全性评价；环境释放IAbstractStudyofSafetyEvaluationofVaccineofRecombinantVacciniaViruswithJapaneseEncephalitisVirusOverthepastfewyears,Japaneseencephalitisvirus(JEV)spreadwidelyinourcou

5、ntryandeveninAsia,threateningthesafetyofpeopleandlivestock.WiththeeffortsoftheChinesegovernmentandrelevantdepartments,themorbidityandmortalityofpeoplesufferingfromJapaneseencephalitisdeclinedgradually.ButthereisnoJapaneseencephalitisvirusvaccineforpigtopreventJapanesee

6、ncephalitisvirus.CurrentlytheattenuatedvaccineSA14-14-2isusedgenerallyforimmunizationofpigs.Therefore,accordingtothecurrentsituationofChina'spigindustry,adedicatedsafeandeffectiveJapaneseencephalitisvirusvaccineforswineisneeded.TherecombinantvacciniavirusvaccinerVTT-JE

7、VEwithEantigengeneofJapaneseencephalitisvirusdevelopedinourlaboratoryhasgoodimmuneeffect,butthesafetyofthevaccinehasnotbeenproven.Inthisstudy,weevaluatedthesafetyoftherecombinantvacciniavirusvaccinerVTT-JEVEdevelopedbyourlaboratory.Inthefirstplace,westudiedthephysicala

8、ndchemicalpropertiesofrecombinantvacciniavirusrVTT-JEVEtreatedbytemperature,pH,ether,trypsin,chloroform,ultrasonicand