中药植物茅苍术抗菌活性及活性物质研究

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1、￣￣单位代码１０６０２Ｉ学号２０１２０１１０５０分类号Ｑ巧９密级公开雜心＾藏＇＞摩ＧＵＡＮＧＸＩＮＯＲＭＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕击学化＾文中药植物茅苍术抗菌活性及活性物质研究Ａｓｔｕｄｙｏｎ化ｅｉｎｈ化ｉｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄａｃｔｉｖｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｏｆ托０Ｃ皆／ｏｄｅｓｌａｎｃｅａＴｈｕｎｂ．ＤＣ．（）学院：生命科学学院专业！生物化学与分子生物学研究方向：酶与蛋白质化学年级：２０１２级研究生：钟慧指导教师：邓业成教授完成

2、日期：２０１５年５月中巧植物茅巷术抗菌活性及活性物质研究专业名称：生物化学与分子生物学申请人：钟慧指导教师；邓业成论文答辩姜员会主席；珠Ｉ姜巧；啼沛―中药植物茅苍术抗菌活性及活性物质研究研究生：钟慧年级：２０１２级导师：邓业成专业：生物化学与分子生物学研究方向：酶与蛋Ａ质化学摘要本文茅苍术俞鸣＞如成■ｓ／ｗｊｃｅａ（Ｔｈｕｎｂ．）ＤＣ．为研究对象，用有机溶剂冷浸提取法提取植物成分。Ｗ玉米大斑病菌左ｘｗｒａＡ舶Ｗ化向ＯＷ（Ｐａｓｓ）ＬｅｏｎａｒｄｅｔＳｕｇｇｓ、玉米小斑病菌＇．＇Ｗｏ公

3、／幻＂机口少航ＮｓｉｋａｄｏｅｔＭｉａｋｅＳｈｏｅｍｌ、金枯砂皮病菌Ｚ）片《＂Ｙ＂Ｆａｗｃｅ打ｌｆ、邮（ｉｙ）崎（）‘‘＇ｎａｎ口ｏ甘蓝黑斑病菌似／ｅｒａｃｅａＭ．Ｉｂｒａｔｈ、甘庶凤梨病菌Ｃｅｒａｔｏｃ卿！ｓ航：ｒａ（Ｄｏｄｅ）ｒｅａｕ）Ｍｏ、茶轮斑病菌化化此化取妃从ｅａｅ巧ａｗａｄａ）Ｓｔｅｙａｅｒｔ、水稻胡麻叶斑病菌ＣｏｃＷｏ６ｏ／ｗ’’Ｗ如！口ＭＷｙＵ）ｅｔＫｕｂ化ａｙＤｒｅｃｈｓｌｅｒｅｔＤａｓｔｕｒ、辣椒炭痘病菌Ｃｏ／／ｅ化／ｎｃＡｗｗＣ巧ｗｄｓｙｄ．））（’’Ｂｕｔｌ、贡巧链格抱

4、菌人你ｎａｒｚａｃ／／ｒ！、烟草黑胚病菌巧妒ｏ如从ｏｒａ戶ｍｙ的ｃｆｌｖｗ．Ｍｃｏｔｏｎａｅ巧ｒｅｄａｄｅＨｅａｎＴｕｃｋｅｒ１０种植物病原真菌为供试菌，米用菌丝生长速率法和抱子萌发法测）定了茅苍术甲醇提取物的抑茜活性。通过有机溶剂萃取、桂胶柱层析、薄层层析等分离技，并结合活性跟踪法对茅苍术抑茵活性成分进行分离纯化术。利用核磁其振谱、质谱分析技术鉴定抑菌活性成分的结构。初步探究了活性物质的抑菌作用机理。采用菌丝生长速率法测定了茅苍术甲醇提取物对１０种植物病原真菌菌丝生长的抑制／活性，ＯＬ时，茅苍术甲醇提取物对其中

5、９种供试茜的抑制率均。结果表明质量浓度为ｌｇ在７０％Ｗ上，其中对玉米大斑病苗、金枯砂皮病菌和烟草黑腔病菌表现出很高的抑制活性，９１．０１％、１００％、１００％。对玉米小斑病菌的抑制活性很低制率仅为８．２３％。抑制率分别为，抑一进步测定了茅苍术甲醇提取物对９种植物病原真菌的毒力。发现茅苍术甲醇提取物？对９种植物病原真菌的毒力较高，ＥＣｓｏ值为化１３１６２．７２６４ｇ／Ｌ之间，对各种植物病原真菌菌丝的毒力相差较大，最大毒力（玉米大斑病菌）是最小毒力（贡巧链格抱菌）的２０．７２倍，对贡掛链格拖菌菌丝的毒力最低，ＥＣｓｏ为２．７２６４

6、ｇ／Ｌ，对玉米大斑病菌菌丝的毒力最高，ＥＣｓｏ值０．１３１６／Ｌ。ｇ。采用抱子萌发法测定了茅苍术甲醇提取物对１０种植物病原真菌抱子萌发的抑制作用结果表明，质量浓度为ｌＯｇ／Ｌ时，茅苍术甲醇提取物除了对玉米小斑病菌抱子萌发的抑制９７０％率只有７．９２％外，对种供试菌的抑制率均在Ｗ上，其中，对玉米大斑病菌、金枯砂皮病菌、茶轮斑病菌、烟草黑腔病菌抱子的萌发有强烈的抑制作用，抑制、甘庶凤梨病菌〇率分别为９５．２４％、１００％、９５．％％、９０．１１％、１００／〇。－利用液液萃取法将茅苍术甲醇提取物初步分成石油跑萃取物、乙酸乙

7、醋萃取物、正Ｔ醇萃取物和水萃取物。经活性测定，发现抑菌活性成分主要存在于乙酸乙醋和石油醜萃取物中。己酸己醋萃取物经娃胶柱层析和薄层层析分离纯化，并结合活性跟踪法，从中分离得到１个活性化合物。经核磁共振（ＮＭＲ）和质谱（ＭＳ）解析，该活性化合物被鉴定为苍术稀内醋丙。采用菌丝生长速率法测定了苍术嫌内酷丙对。１０种植物病原真菌菌丝生长的抑制作用Ｉ结果表明／Ｌ时，苍术婦内酷丙对金枯砂皮病菌、、，质量浓度为化Ｉｇ甘蓝黒斑病菌烟草黑８．腔病菌的抑制活性较高．２０％、７０．７５％、８．，抑制率分别为７０８３％玉米小斑病菌、水；对

8、稻胡麻叶斑病菌的抑菌活性较低，抑制率分别为３３．４１％、２９．７８％。进一步测定了苍术婦内醋丙对８种植物