中国对虾肌肉蛋白激发小鼠过敏反应及其机理研究

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1、密级：公开中图分类号叻全日制口非全日制工戈次粵硕士学位论文专业学位）论文题目：中国对虾肌肉蛋白激发小鼠过敏反应及其机理研究作者姓名：专业学位类别：工程硕士专业学位领域：食品工程研究方向：食品质量与安全指导教师：傅玲琳副教授提交日期：年月DissertationSubmittedtoZhejiangGongshangUniversityforMaster'sDegreeofEngineeringHYPERSENSITIVITYINICRMICETRIGGEREDBYFENNEROPENAEUSCHINENSISMUSCLEPROTEINSAuthor:ChaoSunMajor:FoodEn

2、gineeringSupervisor:Prof.LinglinFuJan.2015CollegeofFoodScienceandBiotechnology,ZhejiangGongshangUniversityHangzhou,310018，中国对虾肌肉蛋白激发小鼠过敏反应及其机理研究摘要对虾等水产品食用蛋白的致敏性对食用者的安全健康存在着潜在的威胁，而致敏性的高低主要取决于食用蛋白中过敏原的种类以及含量。对于易过敏人群而言，食用对虾等富含过敏原的食物易引发全身性过敏反应，出现肠道黏膜过敏症状以及体内一些生理指标的变化。鉴于此，本研宄拟以具有较高经济价值的特色物种中国对虾为对象，建立腹

3、腔注射该虾肌肉蛋白的小鼠过敏模型，结合间接测定小鼠血清中过敏原特异性抗体水平以验证过敏模型的成功建立，通过甲苯胺蓝染色以及免疫组化等手段探讨该虾肌肉蛋白引发小鼠肠道黏膜免疫的机理，最后通过测定小鼠相关脏器比重、抗氧化酶活性以及过敏指示酶的变化，表明了机体内发生过敏的过程与一些生理指标变化的相关性。本研宄旨在为中国对虾的摄入性过敏及体内相关的免疫调控提供相关理论依据，同时对于临床评估中国对虾过敏原的潜在致敏性具有一定的实际参考意义。主要研宄结果如下：、釆用腹腔免疫中国对虾肌肉蛋白方法，建立针对该虾蛋白过敏的小鼠模型。通过电泳和电泳图像分析软件分析，初步推测了中国对虾肌肉蛋白中可能含有的过敏

4、原种类；建立小鼠过敏模型之后，采用间接方法检测小鼠血清中过敏原特异性水平在激发期不同时间点的变化，并通过各剂量组值和对照组值的横向比较，结果大多为倍以上，证明该模型已经成功建立，可用于后续实验研宄。、采用各染色方法及免疫组化方法探讨中国对虾肌肉蛋白引发小鼠肠道黏膜免疫的机理。通过染色对小肠肠道形态学观察初步证明了虾蛋白致敏组小鼠肠道发生炎症且导致上皮损伤；对小肠肥大细胞进行甲苯胺蓝染色发现，虾蛋白致敏组小鼠肠道肥大细胞发生了严重的脱颗粒现象，细胞完整率显著降低；免疫组化检测小肠中相关细胞（、、细胞）以及浆细胞的数量，结果显示该虾蛋白致敏个体内小肠内这些细胞阳性率显著高于对照组；提示虾肌肉

5、蛋白引发肠道黏膜免疫反应是通过介导的速发型过敏反应以及淋巴细胞依赖性延迟型过敏反应协同作用，并伴有淋巴细胞向浆细胞持续分化来实现。、研宄中国对虾肌肉蛋白引发小鼠体内相关脏器比重及酶的变化。釆用酶活试剂盒测定抗氧化酶（、、、、和活性；使用双抗夹心方法检测的浓度；对相对表达量的检测采用方法。对各虾蛋白剂量组和对照组小鼠肝脏、肾脏、脾脏比重比较发现，虾蛋白致敏组小鼠肝、肾发生了不同程度的萎缩，且随着注射剂量加大而萎缩程度越严重，而脾脏则发生肿大，且随着注射剂量加大而肿大程度越严重；通过测定小鼠肝、肾、脾及血清中这几种抗氧化酶的活性发现，虾蛋白致敏组个体内这些酶的活性明显升高；而测定小鼠体内肝、

6、肾、脾和或血清中三种过敏特征酶的变化发现，虾蛋白致敏组个体内肝、肾、脾及血清中活性明显提高、浓度显著增加，而肝脏、肾脏、脾脏内相对表达量下降；提示过敏的发生过程与机体内脏器比重、抗氧化酶的活性、活性、浓度以及相对表达量均有一定的相关性，这些生理指标可通过与机体内其他相关免疫细胞和细胞因子的相互作用，启动机体内相关的免疫应答。关键词：中国对奸；肌肉蛋白；小鼠；过敏反应；點膜免疫；酶HYPERSENSITIVITYINICRMICETRIGGEREDBYFENNEROPENAEUSCHINENSISMUSCLEPROTEINSABSTRACTSensitizationofedibleprot

7、einsfromshrimpandotheraquaticproductshassignificantlypotentialthreatenstotheconsumers'healthandsafety.However,thesensitizationdependsmainlyontheallergentypesandamountinfoods.Forpeoplewhoeasilygotallergy,theintakeofshri