一株弧菌拮抗菌的鉴定、抑菌特性及应用效果的初步研究

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1、相Ａ和＊Ｉ雜ＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ硕±学位论文ＭＡＳＴＥＲＤＫＳＩ：ＲＴＡＴ１０Ｎ一株弧菌诘抗菌的鉴定、抑茜特巧及巧用巧果论文抵目：的初步研究ＰｒｅｌｍｓｉｉｉｎａｒＳｔｕｄｉｅｉ）ｎｄ州ｔｉｆｉｃａｔｉｏｎＩｎｈｉｂｔｏｒ，ｙｙＣｈａｒａｃ化ｒｉｓｔｉｃｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎＡｎｔａｇｏｎｉｓｔｉｃ英文巧目：ＢａｃｔｅｒｉｕｍＳｉｒａｉｎａｇａｉｎｓｔＶｉｂｒｉｏ作者：玉文君巧导教师：田巧利

2、教授学位类别：全曰制学术学位专业名称：水产养巧研巧方向：水产养巧生态学朽可气２０１５ｋ５Ｍ３０ａＩｊＥＥｉＨＨ谨１＾（此论文献给我的恩师、家人、同学从及所有帮助、支持和鼓励过我的朋友。王文君－株弧菌括抗菌的鉴定、抑菌特性及应用效果的初步研究‘ｓ．八学位论文答辩日期；ｗ指导教师签字：答辩委员会成员签字：雞独幼汚明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取，得的研巧成果。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和

3、致谢的地方外论文中，也不包含未获得不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果（注：如没有其化需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名；吝含粟签字日期；ＷＫ年（月（日学位论文版巧使用巧巧书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意下事项：Ｋ学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２，、学校可Ｗ将学位论文的全部或

4、部分内容编入有关数据库进行检索可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华＂＂大学中国学术期刊（光盘版）电子杂志社用于出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）：＿学位论文作者签名；导师签字－：＾＾＾（：１日签字日期年月ｆＨ签字曰期：年６月－株弧菌持抗菌的鉴定、抑菌特性及应用效果的初步研究摘要，近年来伴随着水产养殖业的迅速发展，各种养殖生物受到的病害威胁也越

5、来越严重。病害的发生不仅带来巨大的经济损失，也给环境带来较大的影响。而为防治水产生物病害而滥用抗生素等化学巧物，则会对环境和人类产生严重的影响。益生菌作为抗生素的替代品，可Ｗ抑制病原菌，为养殖动物提供营养，提髙养殖动物的免疫力，改善水质条件，修复微生态环境，因此益生菌的在水一产养殖中使用日渐受到人们的重视。益生菌的作用机理之是通过产生抑菌物质来抑制病原菌的生长。因此，选择具有较高抑菌活性的细菌作为潜在的益生菌进行研巧开发具有重要的实践意义。本研巧对从对邮养殖环境中分离出一株对弧菌病原菌具有措抗作用的菌

6、株进行了鉴定、产物性质分析和应用的初步研究，旨在为将其最终应用于对巧养殖实践提供理论基础。研巧获得的具体结果如下：一１．株狐菌括抗菌的分类鉴定及其抑菌作用研充一本研巧从对卧养殖池塘分离筛选出株对病原菌有括抗作用的菌株，编号レ为ＢＬ、点种法义及牛津杯法对其进行了体外巧抗试验，Ｗ１。采用十字交叉法’确定其抑茜谱。研巧结果思示，菌株ＢＬ１对溶藻弧菌（ＷＡｎＯｆｌ似创、＾ａｒａ伤弧菌｛＞１加Ｋ／ｗｅ／ｎｏ似ａ）具有明显招抗作用。根（與叫及副溶血弧菌（ｐ如ＳＮＡ据细菌形态、生理生化特征和ＷｒＤ序列分析，初步鉴

7、定该茜株为枯草芽一ＢＬ跑杆菌１的最（化采用单因素分析法进步研巧了菌株佳’培养条件，确定其在培养温度２８Ｃ、初始ｐＨ７．０、接种量１％（Ｖ／Ｖ）、转速１９０ｒ／ｍ。ｐｍｉｎ的条件下生长状况最好２．菌株ＢＬ１抑菌产物的初步分离与性质分析本研巧优化培养条件后的枯草芽抱杆菌ＢＬ１（ｆｉｆｌｃＷｗｗＡＷｋ）发酵液为研巧对象，创伤弧菌六《？＞为指示菌，采用牛津杯法作为检測方法，对菌株ＢＵ发脖液中起抑菌作用的抑菌活性物质的性质进行了初步研２４ｈ后究。培养时间对抑菌效果影响的实验显示，培养的菌液抑菌活性最好；

8、采用过滤２４ｈｌ、炮和硫酸煤沉淀及超滤等方法对培养的菌株ＢＬ的发酵液进行初步分离纯化处理，结巧ｉｉｉ示枯管芽抱杆菌ＢＬＩ发酵液中的抑菌物质为胞外分泌型、非蛋０巧、分了营乂于ｌＯｋＤａ的物质；对经过初步分离纯化的抑‘－菌物质进行稳定巧的研