抑菌性乳酸杆菌的筛选、应用及抑菌物质特性研究

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1、山东农业大学硕士学位论文抑菌性乳酸杆菌的筛选、应用及抑菌物质特性研究姓名：田召芳申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：牛钟相;常维山2003.6.1y5D7艿59关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立遴行科学研究所取得的成果。对在论文研究期闻给予指导、帮助和做毒重要贡献鲶个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留移按要求彝蓬家有关部门或瓿梅送交论文纸蕨本和电子版，允许论文被遗阅和借阅

2、。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段傈存论文和汇编本学位论文。保塞论文在解密蓐应遵守此援定。论文作者签名：导师签名：旦昼芳蝴t日期：塑否，舶由系农业大学颈士学位论文抑菌性乳酸杆菌的筛选、应用及抑菌物质特性研究厂摘臻l乳酸杆菌作为动物肠道的优势菌群之一，对生物体的有益作用已被许多磺瑟结果联诞实f““。嚣蔫，国内有关盏生素款擞遘多集中予麓生素制造和应用效聚的试验报道，而按益生豢的特定要求来选君性熊优良的菌株，并研究菌株生物学特性镣关键指标

3、方丽的报道刁i多3阵研究从健康鸡、兔、仔猪的肠邋内容物积掰鳝粪便中分离筛选出5橼生长旺蹙、藏落及萤体彤态典型酶魏酸秆菌，穰据它嚣j对致瘸菌的稚菌滔往、耐酸锻、耐疆盐和苯酚的能力、生长曲线、PH值变化曲线和发酵液中的活菌数赣六项生物学指标进一步筛选出乳酸括菌c2菌株，并对其发黪特性作了较为详细戆褥究，拐步漆定为乳酸释蘧震，动耪实验表疆，C2萤抹静涵麓裁裁爱于预防和治疗由大肠杆菌引起的肠道腹泻疾病效果良好。本研究共分四部分：试验一：爨窍探藿瑟瞧熬巍酸耪蘩熬薅选。l建MRS培养基玖筵康鸡、兔、仔猪的肠邋内容物和新

4、鲜粪便中分离筛选出争椿能够产生明最溶钙环的乳酸菌菌株，综合分析备黼株对致病菌的抑菌活性、耐酸性、胆盐和苯酚瓣受牲、生妖鑫ll线、PH变佳蓝线及不曩嚣闽发黪滚中数活蘩数量，簿选出分离自健康鸡肠道内容物的C2菌株。C2菌株对13株致病菌的高度抑黼率为15．38‰中度抑黼率为53．85％，低度抑菌率为15．38％；能耐受PH馕为3．0、4．0、和5．0的环境，PH谯2．0对对冀鸯较强的掷铡{乍尾；耐受疆盐和苯酚的最高浓度均为O．4％；发酵居2h为迟滞期，熬．4h为刍稿速期，4h一10b_为对数生长期，10h．14

5、h为减速期，14h后处于。暾定期；恒定期后，发酵壤养基的PH俊降到3125左右。对C2德株产抑壤物质时最适发酵条箨送行磺究发瑰：箕覆适接释豢为5‰袋逶遗凄为37℃，最适／培养时间为24h左右，最适PH值范围为7-8，静止培养和摇床培养均可。y试验二：黼种初步鉴定。l对筛选出的C2菌株进行培养特性、菌体形态、生理垒纯黪瞧等方嚣熬撩建，著锋了蕊凌敏感试验。壤攥《糖杰氏维菌攫定手册》第九版“乳杆菌的特性”和《厌氧菌及其感染》中的有关资料，结合c2菌株和标准菌株的特性，初步鉴定c2菌株为乳酸杆菌属。田召芳：治疗性乳

6、酸杆菌的筛选、应用及生物学特性研究尚未鉴定到萃申。药物敏感试验缝果表明，C2菌株对氟哌酸、氯霉素、姨确唑酮、氨苄青霉索、庆大霉豢、虢蹶酸、强力霉索、蒽诺沙攫敏感，对氟哌嗪青霉素、卡那霉素、复方新诺明、磺胺、青霉索G、环丙沙星耐药，ji标准撩鞠比，c2壤椽对药物媳敏感性秘低。驴试验三三；菌种应用。(一)乳酸菌治疗太肠杆菌病效果的实验。阚致病性大肠杆菌攻毒27嚣羚毽藤海兰叁蘩鸡，24h疼发癍率麓100％，海发痣鸡夔爨分残7缓，分别用不问的乳酸菌N-N采用邂只灌服(4天)的方式进行治疗，同时设对照组。结果表明：实

7、验组在治疗后3天停止死亡朔腹泻，除个别鸡外，糖狰获态楚好。对照缀在治疗露虢第7、8天餐有死亡亵馥泻魏蒙。最终，实验组成活率(分别为70％、71．50％、77％、64．3％、61．5、70％)与对照组(23％)之间差舜非常显著。以上结累表明乳酸菌制剂治疗由大肠栝菡弓i起的肠遒黢泻痰瘸效采良好。￥(二)乳酸杆菌、枯草杆菌及抗生桊预防鸡大肠杆菌病效果的比较。选用l曩龄健康海兰囱蛋公雏120只，隧褫分成4缌，l组为对照组，2’缀在饮水中添加氟啜黢，3组灌服乳酸杆菌活菌制荆(保证活菌数大于10亿)，4组椒饲料中添加0

8、．1％(w／w)枯草努孢杆菌的菔生菌剂。采用自由袋食积鑫凌饮拳我方袋。2td攻毒，结暴袭暖，成疆搴：3缰分别逡l缝、2组和4缎高出54．1％、37．5％和50％。体熏变化情况：2td时，3组分别比l组、2组和4组黼出33．33％、26．77％和2L78％。实验结束时(32d)，3缀赘平均体重分剩魄t缝、2缀帮4缀离窭14．05％、18。22筠髑23．46％。料肉比：21d时，三个实验组的累积料肉比均低于对照组，其