高产人参皂苷相关基因筛选

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1、分类号：S567.79单位代码：10193密级：公开学号：2012091硕士学学位位论文高产人参皂苷相关基因筛选Screeningofgenesrelatedtohighyieldofginsenosides作者姓名：刘彤学位类别：农学硕士专业名称：药用植物研究方向：植物药指导教师：张连学教授所在学院：中药材学院2015年6月独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位

2、或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农

3、业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日导师签名：签字日期：年月日摘要人参PanaxginsengC.A.Mey.为五加科人参属植物，含有多种有效成分，而人参皂苷为其主要活性成分，具有多种药理活性。药用植物主要活性成分含量的高低，是影响其品质的主要因素和筛选优良品种的重要依据。药用植物的有效成分多为次生代谢产物，而次生代谢产物在植物中常出

4、现多态现象，并且会在植物的特定部位里积累。由于同一种植物不同种群或个体有效成分含量会存在巨大的差别，这种差异在很大程度上是由基因控制的，是可遗传的。所以可以利用植物的这一特性开发药用植物资源，通过测定不同种群或同一种群内，不同植株的有效成分含量结合分子标记，寻找控制有效成分高含量的相关基因，从而快速、准确的对人参品质进行评价或选育出有效成分含量高的品系。本实验通过HPLC技术、SRAP技术，开展了高产人参皂苷相关基因筛选研究，得出如下结论：1.同一地区同一品种人参含量的差异显著，其中，敦化市DH-2的9种单体皂苷含量之和显著高于本地区其他样本；此外，单体

5、皂苷比较显示，集安市JA-1样本中原人参三醇类皂苷Rg1、Re和Rf含量均为该地区最高；靖宇县内JY-6样本中原人参二醇类皂苷Rd、Rb3、Rb2、Rc含量均为本地区最高。2+2.SRAP的最佳体系：模板2g/L，dNTP0.39mmol/L,Mg1.4mmol/L，上下游引物各0.38μmol/μL，Taq酶0.02U/μL。3.通过SRAP分子标记技术结合人参皂苷含量之间的相关性分析，筛选获得5个基因序列，其中1个与总皂苷含量相关，2个与原人参三醇型皂苷含量相关，2个与原人参二醇型皂苷合成相关基因。同时，发现1个序列中包含一个完整的阅读框（命名为G1

6、），经蛋白序列比对，显示尚无该蛋白的记录。4.成功克隆获得了G1基因，并对G1基因进行了原核表达。功能验证显示该蛋白能有效提高原人参二醇型人参皂苷的含量，且对其他类型人参皂苷的合成无显著影响。关键词：人参，基因，次生代谢，SRAP，功能验证IAbstractPanaxginsengC.A.Meyer,asatraditionalmedicinehasbeenutilizedinChinaforalongtime.Ginsenosidesasthemaineffectivecomponentsofginsenghasmanykindsofpharmacol

7、ogicalactivity.Thecontentoftheactivecomponentsarethemainfactorsthatinfluencethequalityofmedicinalplant.Theeffectiveingredientsofmedicinalplantsaresecondarymetabolites,whilethesecondarymetabolitesinplantsoftenappearedpolymorphismandaccumulateinspecificpartsoftheplant.Becauseofthes

8、ameplantindifferentpopulationsorindividu