苯并[a]芘胁迫对三疣梭子蟹的生物有效性及毒性效应研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M120306644上海海洋大学硕士学位论文题目：苯并[a]芘胁迫对三疣梭子蟹的生物有效性及毒性效应研究英文题目：Bioavailabilityandtoxiceffectofbenzo[a]pyreneonPortunustrituberculatus专业：环境科学与工程研究方向：水生态毒理与环境保护姓名：许高鹏指导教师：沈新强研究员二O一五年五月三十一日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他

2、个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：2015年6月10日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：2015年6月10日日期：

3、2015年6月10日上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注钟俊生上海海洋大学教授主席赵云龙华东师范大学教授委员王云龙东海水产研究所研究员委员蒋玫东海水产研究所研究员委员蒋玫东海水产研究所研究员秘书答辩地点东海所3号楼学术报告厅答辩日期2015-5-31上海海洋大学硕士学位论文苯并[a]芘胁迫对三疣梭子蟹的生物有效性及毒性效应研究摘要多环芳烃（polycyclicaromatichydrocarbons，PAHs）是由两个或两个以上苯环以稠合方式组成的化合物，是最常见的有机污染物之一，具有强致癌性和致突变性。其代表物之一苯并[a]芘（benzo[a]pyrene

4、，BaP）由于在水环境中广泛分布、化学性质稳定、致癌性强等特点而广泛被作为研究的代表。本文选择长江口常见的三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus）作为试验对象，开展BaP胁迫对水生生物生物有效性及毒性效应探究，以期为海洋中PAHs的危害对水生生物的初期预警提供科学有效地依据。本文采用室内模拟构建海水-水生生物体系，将三疣梭子蟹（Portunustrituberculatus）放置于BaP水环境中进行实验并取样。从生理、生化以及分子生物学不同水平上分析BaP在三疣梭子蟹体内生物富集与释放规律的代谢，对各种代谢酶类以及抗氧化酶系统（EROD、GST、SOD、MDA）的

5、影响，对三疣梭子蟹解毒基因（P4501A1、P-gp、HSP70）表达的影响，继而对试验中研究的各类生物标志物在BaP水环境中的污染进行有效的评估，以探讨三疣梭子蟹的生物有效性及BaP对三疣梭子蟹的毒性效应。结果如下：1.BaP对三疣梭子蟹的生物有效性研究（1）富集实验将三疣梭子蟹暴露在不同浓度的BaP中，经过15天的生物富集后结果表明：三疣梭子蟹对BaP具有明显的富集能力。经过15天的富集，生物富集系数和吸-1-1-1收速率随着BaP浓度的增加而减小。在0.05μg·L、0.15μg·L、和0.45μg·L-1-1实验组的富集系数分别为186.29、171.08和163.00mg·

6、kg·d，吸收速率分别为-1-126.08、20.53和14.67mg·kg·d。（2）释放试验经过15天的富集实验后，将三疣梭子蟹转移到清洁的海水中进行15天的释放试验结果表明：三疣梭子蟹对BaP的排出速率较慢，且随着浓度的增加而减-1-1-1小，0.05μg·L、0.15μg·L和0.45μg·L实验组的排出速率分别为0.14、0.12-1-1-1和0.09mg·kg·d。经过15天的释放试验，0.05μg·L实验组趋于恢复到对照组I上海海洋大学硕士学位论文-1-1水平，但0.45μg·L和0.15μg·L试验组依然高于对照组水平（P＜0.05）。2.BaP胁迫对三疣梭子蟹解毒酶

7、系统的影响机制富集试验进行15天，分别于第0天、1天、3天、5天、10天、15天采集三疣梭子蟹鳃、肝脏等组织，测定其各种解毒代谢酶及抗氧化酶的活性。随后将三疣梭子蟹移至清洁海水中，再进行15天释放试验，分别于第18天、20天、25天和30天取样进行酶活性的测定。分析结果显示：（1）从时间-效应关系分析富集实验对各种解毒酶类活性的影响如下：各浓度组三疣梭子蟹肝脏组织中EROD、GST活性随着时间呈现先升高后降低的变化趋势；SOD、MDA活性则随时间的增加而增