缝隙连接在镉致brl 3a细胞凋亡中的作用

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1、？《扩切＇＾一分类号学号—ｙｊ迎ｙ丄＿，＿＿，’－．？－奋，＇占ＵＤＣ＇密级鮮？一？－＾＊＊＊＊？ａｋＭ＾＇占＇＇々■＊．祭癸．身巧换藥叫欠！－－等．＾多Ｃ＇、Ａ、—ＮＩＶ，遍ＹＩｆ？一乂；乂、＾、父＂Ｓ－游争．／兮參：２硕壬学化文、，诗．分＜？（学术型）＝寒＊葦；ＢＲＬ３Ａｍｍ）Ｍｔ：＾ｍｍ］．，－４？…＿■、？．，，一＾丫－二＇心．＇ｖＶ．—異．－巧胡达争Ｌ兴說磋冢巧一’指导教师姓名：刘宗平教授，

2、巧州大学，江苏扬州，２２５００９申请学位级别：硕去学科专业名称：临床兽医学；２０１５２０１５－：论文提交日期：年４月论文答辩日期：年６月＿＿＼，０。学位授予单位：扬州大学学位授予日期：２０１５年６月＿＿＿深＇＇■，，答辩委员会主席：六贫為吁；：、考、．ｙｐｊｙ－．．－三！Ｔ｜＾＾穿＇特－皆－三、容Ｗ緊＇，－■．－－－－＇．戶－、—乃‘—．＾、．换：？ｖ、聲．成實謂％Ｖ考繁為济：．歷年６月併若若＾您．占给病冰—；參山络Ａ．￣＇＇心－、心乏Ｖ、一：、亦．ｖＫＶ今

3、苗公Ｖ．缝隙连接在搞致ＢＲＬ３Ａ）细胞罔ｔ中的作用－ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｕｎｃｔｉｏｎｏｎｃａｄｍｉｕｍｉｎｄｕｃｅｄｇｐｊａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎＢＲＬ３乂ｃｅｌｌｓ研究生：胡迪学科：临床营医学导师：刘宗平教授巧州大学兽医学院２０１５年６月胡迪亡中的作用１：缝隙连接在锅致ＢＲＬ３Ａ细胞调缝隙连接在福致ＢＲＬ３乂细胞调ｔ：中的作用中文摘要缝隙连接（ＧＪ）介导相邻细胞间的物质交换和信息交流，在调控细胞生长、增殖、转一化和调亡的稳态平衡中起着重要作用，。福是种重要的工业和环境

4、污染物可诱导多种细胞调亡。为探讨領对大鼠肝细胞（ＢＲＬ３Ａ）缝隙连接通讯功能的影响及缝隙连接在福致Ｂ化３Ａ细胞调亡中的作用，本实验Ｗ不同浓度的醋酸福（０、２．５、１０ａｍｏｌ／Ｌ）作用ｍｉＬ３Ａ｜－－细胞１２ｈ或１０ｘｍｏｌ／Ｌ醋酸铜、５ｘｍ〇ｙＬ１８３甘草次酸ＩＳｌｃｒｒｈｉｚｉｃａｃｉｄ，ＧＡ（单独｜｜｜Ｐｇｙｙ）或联合作用细胞９ｈ，采用实时分析技术（ＲＴＣＡ）测定细胞指数（ＣＩ），显微镜观察细胞形态，划痕染料标记示踪法巧Ｌ／ＤＴ）检测细胞缝隙连接通讯（ＧＪＩＣ），激光共聚焦观察缝隙连接蛋白２＋２＋Ｃｘ４３分布

5、，ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染核，流式细胞术测定胞内Ｃａ浓度（［Ｃａ］，）和细胞调亡率，３２ｘ４３－－－免疫印迹测定Ｃｘ、Ｃ、ｐＣｘ４３、Ｂａｘ、Ｂｃｌ２、ｃａｓｐａｓｅ３和ＭＡＰＫ成员ＥＲＫ、ＪＮＫ和３８的活化。ｐ结果表明：①０、２．５、１０叫ｎｏｌ／Ｌ領暴露１２ｈ后，Ｃｌ值显著或极显著降低（尸＜化０５或戶＜０．０１），细胞间巧光黄（ＬＹ）两侧扩散距离极显著减少（戶＜０．０１），Ｃｘ４３在细胞膜上２－＜分布减少、胞内增多，Ｃｘ３、Ｃｘ４３和ｐＣｘ４３表达显著或极显著降低（ｆ０．０５或＾＜化０１）。＾９＾３２＞０＠

6、１０１１１１〇１／１福暴露１１后，１￥两侧扩散距离明显减少，〔乂表达无显著变化（尸．０５），＾２＋２＋＜－＜Ｃｘ４３表达极显著降低（ｆ０．０１），ｐＣｘ４３表达极显著升高（戶０．０１），ａ浓度（ａ）胞内Ｃ［Ｃ］，极显著升高（戶＜化０１）。缝隙连接阻滞剂（ＧＡ）和領联合作用对簡引起的Ｃｘ３２、Ｃｘ４３和＋２－３＞０５＜Ｃｘ４表达变化无明显影响（？．０），但能增强儒引起的ａ的升高（户０．０１）。０ｐ［Ｃ］，③１［ｉｍｏｌ／Ｌ福暴露９ｈ后，可引起ＢＲＬ３Ａ细胞核形态的变化，出现核皱缩、核碎裂等典型的调亡特征，并增加肝细胞的调亡率。ＧＡ和

7、賴联合作用可増强備诱导的胞核形态的改变、－－－＜０ｌｌ细胞洞亡率升高和Ｂａｘ／Ｂｃ２比值和ｃｅａｖｅｄｃａｓｐａｓｅ３／ｐｒｏｃａｓｐａｓｅ３比值升高（ｆ．０５或ＥＲＫ、ＮＫ和戶＜０．０１）。福可诱导Ｊｐ３８的磯酸化水平极显著上升（ＰＯ．Ｏｌ）。ＧＡ和福联合作用能极显著增加簡引起的ＥＲＫ和ｐ３８憐酸化水平的升高（户＜０．０１），但对ＪＮＫ的磯酸化水平无显著影响（Ｐ＞０．０５）。ＢＲＬ３ＡＧＪＩＣ结论，福对细胞有明显的细胞毒性，可抑制，其机制可能是領诱导ＢＲＬ２＋３Ａ细胞Ｃｘ４３分布异常，Ｃｘ＾和Ｃｘ４３表达及Ｃｘ４３磯酸化水

8、平的改变，及［Ｃａ，升高。］缝隙连接阻滞后可增强儒对肝细胞的毒性损伤，促进領诱导的细胞调亡，这可能与调亡