电针对脑缺血再灌注大鼠脑内p38mapk信号通路影响的实验研究

电针对脑缺血再灌注大鼠脑内p38mapk信号通路影响的实验研究

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1、分类号:学校代码:密级:学号:湖南中医药大学硕士学位论文电针对脑缺血再灌注大鼠脑内信号通路影响的实验研究学科专业:针灸推拿学研究方向:针灸推拿对中风病的基础与临床研究研究生:张昕导师姓名及职称:周国平教授学位类型:科学学位中国湖南长沙二零一五年五月原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在导师指导下,独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中特别加以标注引用的内容外,本论文中不包含任何他人已经发表或撰写过的研宄成果,也不包含为获得湖南中医药大学或其他单位学位、证书而使用过的材料。与我共同对本研宄所作过重要贡献的单位及个人均已在论文中作了明确说明并致谢。作者签名年月

2、曰关于学位论文使用授权说明本人完全了解湖南中医药大学有关收集、保留及使用学位论文的规定,即:学校可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文;可以公布学位论文的全部或部分内容,允许学位论文被查阅和借阅;学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文或通过国内有关权威机构收录论文全文,向社会提供信息服务。保密论文在解密后守此规定)作者签名:系%导师签名:年夕月》日目录中英文缩略表中文摘要英文摘要弓言第一部分材料与方法实验材料实验动物实验仪器实验器械实验试剂实验方法动物分组动物模型制备穴位定位施治方法标本提取指标测定方法统计方法第二部分结果与分析电针对脑缺血再灌注(损伤大鼠神

3、经功能缺损评分影响电针对损伤大鼠脑组织大体形态学的影响(染色)电针对损伤大鼠海马区细胞形态学的观察(染色)电针对丨损伤大鼠海马区细胞凋亡指数的影响(检测)电针对丨损伤大鼠海马区细胞麟酸化表达的影响(免疫组化检测)第三部分讨论模型的选择与评价祖国医学对缺血性脑血管疾病的认识选穴依据4西医学对脑缺血再灌注的认识脑缺血再灌注损伤与细胞凋亡的关系细胞凋亡与的关系:电针对的影响存在的问题与展望结仓参考文献附录:综述中英文缩略表按首字母顺序排列)英文缩写英文名称中文全称颈总动脉二苯基联苯胺迟发性神经元死亡电针颈外动脉细胞外信号调节蛋白激酶苏木精伊红颈内动脉缺血性脑血管疾病脑缺血再

4、灌注氨基末端激酶丝裂原活化蛋白激酶大脑中动脉大脑中动脉阻塞磷酸盐缓冲液程序性死亡分子量为的酪氨酸磷酸化蛋白斯普拉道来(氏)大鼠,,氯化三苯基四氮唑原位末端标记法电针对脑缺血再灌注大鼠脑内信号通路影响的实验研宄中文摘要目的:通过观察电针“尺泽、合谷”和“足三里、三阴交”两组穴位对脑缺血再灌注大鼠神经功能缺损评分、脑组织形态学、细胞凋亡及磷酸化的影响,探讨电针对抗脑缺血再灌注损伤的可能作用机理,为临床应用针灸防治脑缺血再灌注提供部分实验依据。方法:只健康雄性大鼠随机分为组:假手术组、模型组、电针组、阻滞剂组、电针阻滞剂组,只组。每组大鼠依据再灌注的不同时间点,随机分为个时

5、间点亚组:组、组、组、组、组,每亚组只。除假手术组外,其余组大鼠均采用改良线栓法制备脑缺血再灌注模型,电针组予每曰次电针治疗,阻滞剂组于造模前在相应脑区注射阻滞剂电针阻滞剂组造模前注射,后予电针治疗。采用神经功能缺损评分测试大鼠神经缺损症状,染色和染色法观察大鼠脑组织形态学改变,法检测大鼠神经细胞凋亡指数,免疫组化法检测缺血区蛋白表达情况。结果:神经功能缺损评分比较:造模后,与假手术比较,其佘四组大鼠神经缺损评分明显高于假手术组,有显著的统计学差异〈,说明脑缺血再灌注造模成功。随着缺血再灌注时间的延长,神经缺损评分呈降低趋势。治疗后,与模型组比较,电针组、阻滞剂组、电

6、针阻滞剂组评分均低于模型组,且各组及时间点评分降低,具有统计学意义(〈组时间点评分下降,具有显著统计学意义(〈。电针刺激、阻滞剂及两者合用三者之间比较,无统计学意义(。染色观察缺血区脑细胞形态变化:假手术组细胞形态完整,结构清晰核膜完整,核仁清晰;模型组细胞间隙增宽,神经元数量减少,排列紊乱,核膜与周围分界不清,核仁固缩;电针组、阻滞剂组及电针阻滞剂组神经组织损伤较模型组轻,细胞排列较整齐,结构较完整,胞体轻中度肿胀,存活神经元较多。染色观察脑组织大体形态学改变:假手术组大鼠脑组织被染成均匀一致的红色,其余组大鼠造模后,脑组织出现大小不一的苍白色区域,差异具有统计学意

7、义(,随着时间的延长,梗死面积逐渐增加。与模型组比较,电针组、阻滞剂组、电针阻滞剂组梗死面积不同程度的缩小,再灌注后,各组大鼠面积缩小具有统计学意义(。及时,阻滞剂组梗死面积较电针组、电针阻滞剂组大,电针且滞剂组梗死面积较电针组小〈。法观察神经细胞凋亡:与假手术组比较,其余四组大鼠阳性细胞数显著增多〈。模型组大鼠阳性细胞数呈时间依赖性,时达高峰,减少最多,与模型组比较,电针组、阻滞剂组、电针阻滞剂组凋亡指数均下降,多数组与模型组比较有较明显下降(〈或〈。阻滞剂与电针刺激合用时,凋亡指数下降明显,与单独使用时比较,时间点差异具有统计学意义(〈;单独采用

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