溃疡性结肠炎虚实证候分型与肠道菌群结构的差异性研究

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1、学院代号10716学号012071412313专业代码10601密级陕西中医药大学ShaanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文溃疡性结肠炎虚实证候分型与肠道菌群结构的差异性研究学位申请人李舒专业名称中西医结合基础医学硕士学位申请学位类型指导教师姓名杨晓航论文提交日期2015年5月陕西中医药大学学位论文独创性声明及使用授权声明学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作

2、品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果并由本人所承担的法律责任。学位论文作者签名^4^期：yi"年^月关于学位论文使用授权的声明陕西中医药大学有权保留使用本人学位论文，同意学院按规定向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权陕西中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公布（包括刊登)论文的全部或部分内容。(保密论文在解密后应遵守此规定）日期：wr年r月一。闩溃疡性结肠炎虚实证候分型

3、与肠道菌群结构的差异性研究中文摘要【目的】通过对溃疡性结肠炎（UC）患者和健康人肠道菌群的多样性、相似性以及种属构成等研究，阐明UC不同虚实证候间肠道菌群结构的差异性，进一步通过虚实证候与肠道菌群结构差异的差异性分析，为阐明UC虚实证候的物质基础和病理机制以及UC不同虚实证候患者之间肠道菌群结构的差异性提供理论基础和实验依据。【方法】以UC患者与健康志愿者为研究对象，建立中医证候诊断、纳入和排除标准，分为湿热内蕴证组、脾胃气虚证组、脾虚湿热证组和健康对照组，采集粪便标本并提取粪便菌群总DNA；经16SrDNAV3区PCR扩增后，采用变性梯度凝胶电泳（DGGE）

4、进行肠道菌群DNA指纹图谱分析；MiSeq测序技术开展肠道菌群16SV3+V4区高通量测序及生物信息学分析；基于16SrDNA指纹图谱和16SV3+V4区生物信息学数据，研究分析UC不同虚实证候组患者与健康人群肠道菌群结构的差异性。【结果】肠道菌群DNA指纹图谱分析结果表明：图谱中三种证型所呈现的条带数没有明显差异。三种UC证型患者肠道菌群多样性、相似性有差异，并且三种UC证型的患者肠道菌群的组内相似性系数高于组间相似性系数。脾胃气虚证组UC患者组内相似性系数最高，脾虚湿热证组UC患者组内相似性系数最低。三种证型中，湿热内蕴证组UC患者的多样性指数最低，脾胃气

5、虚证组UC患者的多样性指数最高。16SV3+V4区测序及生物信息学分析结果表明：UC患者拟杆菌和厚壁菌门所占比例相对其他组较大且数量基本恒定，但它们在不同虚实证候组内中所占的比例有显著差异。厚壁菌门在湿热内蕴组及脾虚湿热组中所占比例低于健康人组（P＜0.05），其中韦荣球菌在厚壁菌门中较为突出，在湿热内蕴组及脾虚湿热组中所占比例低于健康人组（P＜0.05），其在脾胃气虚组中所含比例高于湿热内蕴组（P＜0.05）。变形杆菌门在脾虚湿热组中所占比例高于脾胃气虚组（P＜0.05）。变形杆菌门中嗜血杆菌在湿热内蕴组中所占比例高于脾胃气虚组和脾虚湿热组（P＜0.05）。

6、拟杆菌门中拟杆菌和普氏菌在四组中所占比例也有所不同。拟杆菌在湿热内蕴组中所占比例高于健康人组（P＜0.05）。普氏菌在三组虚实证型的溃疡性结肠炎受试者肠道菌群中所占比例均低于健康人组（P＜0.05）。放线菌门中棒状杆菌在湿热内蕴组中所占比例高于脾胃气虚组（P＜0.05）。真杆菌属在脾胃气虚组和脾虚湿热组中所占比例均小于健康人组（P＜0.05）。DGGE法和测序结果反映出的UC患者不同虚实证候组及健康人组的肠道菌群结构差异性和相似性结果基本一致。i陕西中医药大学2015届硕士学位论文【结论】1.UC三类虚实证候患者与健康人比较，肠道菌群的相似性、多样性均存在差异

7、。2.UC三类虚实证候患者与健康人比较，肠道菌群门水平和种属水平的细菌构成存在差异性，门水平上差异可能存在于厚壁菌门所占比例；种属水平的差异可能存在于韦荣球菌、拟杆菌和普氏菌所占比例。3.UC三类虚实证候患者之间肠道菌群差异性可能存在于厚壁菌门和变形菌门的构成比。【关键词】溃疡性结肠炎；虚实证候；肠道菌群；16SrDNA；差异性。ii溃疡性结肠炎虚实证候分型与肠道菌群结构的差异性研究StudyonthecorrelationbetweendeficiencyandexcesssyndromesofulcerativecolitisinTCMandthestru

8、ctureofintestinalmi