流感疫苗免疫人群血清中抗ha茎部广谱中和抗体检测

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1、单位代巧:84501IS8450112016学号:.?I靈議一>分AI:硕女#傻化A顯、萬四I流感疫苗免疫人群血清中抗HAI胃摹部广谱中和抗体检测!^、m'.道Z防1甩1圓!可L誦iP^|jjj|培养单位:中国疾控中心病毒病所!导师:周剑芳硏究员I心^畐"导j,:秦壁助理研究员_专业:病原生物学2015年单位代码:84501学号:S8450112016密级:公开硕±学位论文流感疫苗免疫人群血清中抗HA茎部广谱中和抗体检测巧±研巧生:赵晓朋导师:周劑芳研

2、究贡副导师:秦望助理研究黄中国疾病预防控制中也巧者巧所国家流感中也申请学位级别:硕±研巧生专业名称:巧原生物学学位授予单位:中国巧巧预巧控制中也二〇—五年六月学位论文原创性、真实性声明本人郑重声明:《流感疫苗免疫人群血清中抗HA茎部广谱中和抗体检测》是本人在中国疾病预防控制中也《病原生物学》专业攻读硕±学位期间,在导师指导下完成的硕±学位论文。我承诺:本论文中巧涉及的所有数据、试验记录义及研究结果均真实可信,引用资料已注明出处,无劃窃、篡改、抄袭之行为。如本论文原创性方面出现问题,我愿负法律责任。本课题的研究成果归中国疾病预

3、防控制中也所有,发表文章的单位署名为中国疾病预巧控制中瓜。特此声明!学位论文作者签名:研究生导师C签名):()於恥朋I於冬(i2015年月日2015年月|日|^"目录缩略词表1中文摘要3Abstract5前胃8一HA10第部分血清中抗抗体检测方法的建立1假病毒中和试验101110.欄1.2方法12-121PvrccH5/lSZ)12..(质粒的构建1.2.2流感假病毒的包装151.2.3流感假病毒感染性的验证161218..4流感假病毒中和试验13.结果182间接酶联

4、免疫吸附(EL投A)试验252.1材料252.2施262.3结m263ometitiveLISA)7竞争性酶联免疫吸附试验(CpE23-1材料2732.施283.CR.21生物素标记单克隆抗体6261283.2.2竞争性ELISA方法的建立及验证29339.结果2431舰第二部分季节性流感疫苗免疫人群血清中抗HA抗HA茎部广谱中和抗体检测341材料与方法342鄉3721HA巧.结合性抗体水平.2假病毒中和试验结果2402.3血凝抑制试验结果4324竞争性EL投A

5、结果44.2.545疫苗评价时需要综合考虑交叉反应性抗体3龍46第H部分2009pdmHlNl疫苗免疫人群血清中抗HA茎部广谱中和抗体检测.481材料与方法482结果492.1HA结合性抗体滴度492.2假病毒中和试验结果512355.血凝抑制试验结果2.4竞争性EL松A结果%3職58全文讨论60参考文献61综;^63针对流感病毒血凝素HA的广谱中巧抗体的研究进展树致胃7779个人简历附录已发表论文全文及补充材料80中国疾病预防控制中屯、硕±学位论文缩略词表 ̄

6、英文缩写英文名称中文名称IIHAHemagglutinin血凝素NANeuraminidase神经氨酸昔酶PPsPseudovirusparticles假病毒mAbmonoclonalAntibody单克隆抗体BnAbsBroadlyneutralizingantibodies广谱中和抗体MDCKMad--in口arbcannekidnadnDarbyi巧Miy狗肾细胞----tri-tlLhTPCKsnNosyenlalaninechloromethl甲苯横酷苯丙yppyyke--tonet

7、rypsin氨酸氯甲基丽腺蛋白酶FSFerretsera雪貂血清EDTAEthyleneDiamineTetraaceticAcid己二胺四乙酸FBSFetalbovineserum胎牛血清ELISAEn-zymelinkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附试验PBSPhosphateBufferedSaline磯酸缓冲盐溶液HIH-emagglutinationinh

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